國家藥典委員會重新制定細(xì)胞毒性檢查法國家藥包材標(biāo)準(zhǔn)，公示期三個月。此次擬制定的細(xì)胞毒性檢查法主要用于醫(yī)藥包裝容器、材料細(xì)胞毒性檢查。

本法系將供試品或供試品液接觸細(xì)胞，通過對細(xì)胞形態(tài)、增殖和抑制影響的觀察，評價(jià)供試品對體外細(xì)胞的毒性作用。

試驗(yàn)用西細(xì)胞 推薦使用小鼠成纖維細(xì)胞L-929。試驗(yàn)時(shí)采用傳代48~72h生長旺盛的細(xì)胞。

試驗(yàn)前的準(zhǔn)備 與樣品及細(xì)胞接觸的所有器具均需無菌。必要時(shí)可采用濕熱滅菌如115度保持30分鐘；干熱滅菌如250度保持30分鐘或用1480度保持2h。

防潮醫(yī)藥包裝

供試品液的制備 提取介質(zhì)的選擇宜反映出提取的目的，優(yōu)先選用含血清哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基作為提取介質(zhì)。除另有規(guī)定外，按品種項(xiàng)下規(guī)定的提取介質(zhì)制成供試品液。將供試品切成0.5cmX2cm條狀，用濕熱滅菌或紫外線照射消毒后，置玻璃容器內(nèi)。

相對增殖度法

陰性對照液制備  為不加供試品的細(xì)胞培養(yǎng)液

陽性對照液制備  取生物毒性陽性參比物質(zhì)， 照供試品制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行，如6.3%苯酚的細(xì)胞培養(yǎng)液。

檢查法  取33個培養(yǎng)瓶，分別加入4X10⁴ 個/ml濃度細(xì)胞懸液1ml，細(xì)胞培養(yǎng)液4ml，置（37±1）度，（5±1）%CO₂的條件下培養(yǎng)24h。培養(yǎng)24h后棄去原培養(yǎng)液。

陰性對照組：取13個培養(yǎng)瓶加入5ml陰性対照液：陽性對照組 取10個培養(yǎng)瓶加入5ml陽性對照液：實(shí)驗(yàn)組，取10個培養(yǎng)瓶加入5ml含50%供試品液的細(xì)胞培養(yǎng)液，置（37±1）度，（5±1）%CO₂的條件下培養(yǎng)7天。

細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和計(jì)數(shù)：再更換細(xì)胞培養(yǎng)液的當(dāng)天，取3瓶陰性對照組，并在更換后第2、4、7天，每組各取3瓶進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)觀察和細(xì)胞計(jì)數(shù)。

毒性評定 細(xì)胞形態(tài)分析按下表所示。

根據(jù)各組細(xì)胞濃度按下式計(jì)算細(xì)胞相對增殖度（RGR）：

結(jié)果評價(jià)  試驗(yàn)組相對增殖度（以第7天的細(xì)胞濃度計(jì)算）為0級或1級判為合格。試驗(yàn)組相對增殖度為2級，應(yīng)結(jié)合形態(tài)綜合評價(jià)，輕微毒或無毒的判為合格。試驗(yàn)組相對增殖度為3級~5級判為不合格。