細(xì)胞毒性是化學(xué)物質(zhì)（藥物）作用于細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和/或生理過程，如細(xì)胞膜或細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，細(xì)胞的新陳代謝過程，細(xì)胞組分或產(chǎn)物的合成、降解或釋放，離子調(diào)控及細(xì)胞分裂等過程，導(dǎo)致細(xì)胞存活、增殖和/或功能的紊亂，所引發(fā)的不良反應(yīng)。

高密度聚乙烯瓶

供試品制備  將樣品用純化水沖洗干凈（根據(jù)實(shí)際情況需要），用濾紙吸干。

若用供試品液進(jìn)行試驗(yàn)，將制備的供試品液附著到生物多性吸收性的基質(zhì)（例如超細(xì)硼硅玻璃纖維濾紙）上，支撐面積不少于100個(gè)單位的圓形供試品。

陰性對照制備 取生物毒性參比物質(zhì)，例如：高密度聚乙烯。按照供試品制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行。

陽性對照制備  取生物毒性陽性參比物質(zhì)，例如含二乙基二硫代氨基甲酸鋅的聚氨酯（ZDEC）。按照供試品之輩項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行?？刹捎?0%二甲基亞砜（DMSO）溶液，附著到生物惰性吸收性的基質(zhì)上。

檢查法

取細(xì)胞懸浮液（1X10⁵個(gè)/ml）7ml，均勻分散至直徑60mm的培養(yǎng)皿中。置于含（5±1）%CO₂氣體的西跑培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h至匯合單層細(xì)泡，棄去培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基，將融化瓊脂冷卻至48度左右與含20%血清的2倍新鮮哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基混合，使瓊脂最終質(zhì)量濃度不大于2%，在每只培養(yǎng)皿內(nèi)加入新制備的含瓊脂培養(yǎng)基（要足夠博以利于可瀝濾物的擴(kuò)散）。

防潮醫(yī)藥包裝

含瓊脂培養(yǎng)基凝固后，可適當(dāng)?shù)牡娜旧椒ㄈ旧?，將供試品、陰性對照、陰性對照小心地放在培養(yǎng)皿的固化瓊脂層表面。

每個(gè)供試品、陰性對照、。陽性對照試樣間盡量保持合適的距離并遠(yuǎn)離培養(yǎng)皿壁，每一培養(yǎng)皿中放置不超過3個(gè)試樣，每個(gè)試樣至少設(shè)置2個(gè)平行，置（37±1）度含（5±1）%CO₂的細(xì)胞培養(yǎng)箱中至少培養(yǎng)（24±2）h。培養(yǎng)箱宜保持適當(dāng)?shù)臏囟取Ｓ蔑@微鏡觀察每個(gè)供試品、陰性對照、陽性對照試樣反應(yīng)區(qū)域。用活體染料如中性紅可有助于檢測細(xì)胞毒性。

結(jié)果評價(jià) 進(jìn)行細(xì)泡毒性評價(jià)和分級，對照下表陰性對照為0級（無毒）、陽性對照不小于3級（中度毒），則細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)系統(tǒng)有效。檢測提取液時(shí)，供試品液的反應(yīng)區(qū)域應(yīng)減去介質(zhì)對照的反應(yīng)區(qū)域，再進(jìn)行毒性分級。供試品和或供試品液細(xì)胞毒性大于2級（輕度毒）以上時(shí)，則判為合格。