新版藥用塑料瓶細(xì)胞毒性測定法——提取法:
陰性對(duì)照制備 取高密度聚乙烯參比物質(zhì),照供試品溶液制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行
陽性對(duì)照制備 取生物毒性陽性參比物質(zhì),照供試品溶液制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行
藥用HDPE瓶
檢查法 取生長旺盛的細(xì)胞懸浮液(1X105個(gè)/ml)2ml,置直徑25mm的平皿中培養(yǎng)單層細(xì)胞。培養(yǎng)不少于24h細(xì)胞至少達(dá)到80%近匯合后,吸去培養(yǎng)基,替換為供試品液、陰性対照液或陽性對(duì)照液。含血清培養(yǎng)基提取液和不含學(xué)清培養(yǎng)基提取液無需稀釋,平行試驗(yàn)2份。所有的培養(yǎng)物在(37±1)度,含(5±1)%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。48h后,在顯微鏡下觀察培養(yǎng)物,如有必要,進(jìn)行染色。
結(jié)果評(píng)價(jià) 按表6 進(jìn)行毒性評(píng)價(jià)和分級(jí)。若試驗(yàn)系統(tǒng)不成立,重復(fù)試驗(yàn)。供試品不超過2級(jí)(輕微毒),則判為合格。如需進(jìn)行劑量——反應(yīng)程度評(píng)價(jià),可通過定量稀釋供試品液,重復(fù)試驗(yàn)。