2

在無可用基質(zhì)的情況下（例如短缺、3R原則-減少、優(yōu)化、替代），是否可以使用類似的替代基質(zhì)（例如人血漿）稀釋樣品？

可以，只要替代基質(zhì)的使用符合指導(dǎo)原則的建議，包括準(zhǔn)確度和精密度、無干擾等，并以相同的方式處理稀釋質(zhì)控樣品（QC）。需要充分論證理由，原因在于上述方法可能會(huì)受到質(zhì)疑。

2,3,4

在研究樣品分析期間添加新的QC濃度水平，而不改變色譜分析或配體結(jié)合分析中的校準(zhǔn)曲線范圍時(shí)，是否有必要通過部分驗(yàn)證來驗(yàn)證新的QC濃度水平？

在新的QC濃度水平應(yīng)用于研究樣品分析之前，應(yīng)對其精密度和準(zhǔn)確度加以證明。上述可作為部分驗(yàn)證或作為生物分析報(bào)告的注釋加以記錄。

3

是否可接受根據(jù)零濃度樣品的分析結(jié)果證明IS本身、任何雜質(zhì)或其同位素穩(wěn)定性不存在分析干擾？

是的，這對方法驗(yàn)證和研究樣品分析均適用。

3

關(guān)于長期穩(wěn)定性，失敗的時(shí)間點(diǎn)是否意味著不應(yīng)繼續(xù)推進(jìn)后面的時(shí)間點(diǎn)？

可對其他時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行評價(jià)。應(yīng)對任何不符合要求的情況進(jìn)行調(diào)查，以確定根本原因和對穩(wěn)定性評估的影響。

3

有關(guān)物質(zhì)的理化性質(zhì)是否可用于證明在質(zhì)譜（MS）分析期間有關(guān)物質(zhì)不會(huì)共洗脫或干擾分析物測定？

是的，但如果不能通過排除有關(guān)物質(zhì)和分析物存在共洗脫，則需要進(jìn)行額外研究以證明色譜分離（例如，對于異構(gòu)體）。如果分析物和有關(guān)物質(zhì)共洗脫，則應(yīng)評價(jià)基質(zhì)效應(yīng)（離子抑制/增強(qiáng)）和回復(fù)轉(zhuǎn)化。

3

如何驗(yàn)證儲(chǔ)備溶液是否準(zhǔn)確制備？

通過比較兩份單獨(dú)制備的儲(chǔ)備溶液并證明其實(shí)測響應(yīng)值的差異在5%以內(nèi)。

4

當(dāng)分析物是免疫球蛋白且檢測方法包括分析物特異性試劑（例如，使用抗獨(dú)特型抗體作為捕獲和/或檢測試劑）時(shí)，是否需要在驗(yàn)證中用不相關(guān)的免疫球蛋白檢測特異性？

只要在試劑特性鑒定期間已對試劑的特異性進(jìn)行了評價(jià)，則無需用不相關(guān)的免疫球蛋白評估特異性。

5

應(yīng)如何對關(guān)注事項(xiàng)或已測樣品再分析（ISR）失敗的可能性進(jìn)行調(diào)查？

應(yīng)按SOP開展調(diào)查，并應(yīng)考慮整個(gè)過程，包括樣品處理、加工和分析。還應(yīng)包括科學(xué)評估是否存在影響生物分析方法的問題，例如干擾和不穩(wěn)定性。

6

鑒于M10允許對種屬內(nèi)基質(zhì)或種屬間相同基質(zhì)進(jìn)行部分驗(yàn)證，是否允許在非臨床研究采用的色譜方法中使用N-in-1方法（1次驗(yàn)證中使用多個(gè)種屬或基質(zhì)）？

也可以使用這種方法。但是，在使用這種方法時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎；需要充分論證理由，原因在于上述方法可能會(huì)受到質(zhì)疑。