9105 中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原則公示稿（第二次）
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9105 中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原則

中藥生物活性測(cè)定法是以藥物的生物效應(yīng)為基礎(chǔ)，以生物統(tǒng)計(jì)為工具，運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，測(cè)定藥物有效性的一種方法，從而達(dá)到控制和評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的作用。其測(cè)定方法包括生物效價(jià)測(cè)定法和生物活性限值測(cè)定法。中藥的藥材來(lái)源廣泛、多變，制備工藝復(fù)雜，使得中藥制劑的質(zhì)量控制相對(duì)困難，此外，中藥含有多種活性成分和具有多種藥理作用，因此，僅控制少數(shù)成分不能完全控制其質(zhì)量和反映臨床療效。為了使中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能更好地保證每批藥品的臨床使用安全有效，有必要在現(xiàn)有含量測(cè)定的基礎(chǔ)上增加生物活性測(cè)定，以綜合評(píng)價(jià)其質(zhì)量。

本指導(dǎo)原則的目的是規(guī)范中藥生物活性測(cè)定研究，為該類研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、方法學(xué)建立等過(guò)程和測(cè)定方法的適用范圍提供指導(dǎo)性的原則要求。

基本原則

符合藥理學(xué)研究的基本原則 建立的生物活性測(cè)定方法應(yīng)符合藥理學(xué)研究的隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)的基本原則；具備簡(jiǎn)單、精確的特點(diǎn)；應(yīng)有明確的判斷標(biāo)準(zhǔn)。體現(xiàn)中醫(yī)藥特點(diǎn) 鼓勵(lì)應(yīng)用生物活性測(cè)定方法探索中藥質(zhì)量控制，擬建立的方法的測(cè)定指標(biāo)應(yīng)與該中藥的"功能與主治"相關(guān)。對(duì)擬研究的中藥，應(yīng)充分調(diào)研其功能主治、適應(yīng)癥、用法用量，結(jié)合臨床應(yīng)用及現(xiàn)代藥理研究進(jìn)行綜合分析，通過(guò)一個(gè)或多個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)其作用。品種選擇合理 擬開(kāi)展生物活性測(cè)定研究的中藥材、飲片、提取物或中成藥應(yīng)功能主治明確，其中，優(yōu)先考慮適應(yīng)癥明確的品種，對(duì)中藥注射劑、急重癥用藥等應(yīng)重點(diǎn)進(jìn)行研究。

方法科學(xué)可靠 應(yīng)可行、可重復(fù)，品種項(xiàng)下應(yīng)制定明確的判定標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)優(yōu)先選用生物效價(jià)測(cè)定法，不能建立生物效價(jià)測(cè)定的品種可考慮采用生物活性限值測(cè)定法，待條件成熟后可進(jìn)一步研究采用生物效價(jià)測(cè)定法。

基本內(nèi)容

 1. 實(shí)驗(yàn)條件

試驗(yàn)系選擇 生物活性測(cè)定所用的試驗(yàn)系，包括整體動(dòng)物、離體器官、血清、組織、細(xì)胞、微生物、亞細(xì)胞器、受體、離子通道和酶等。試驗(yàn)系的選擇與實(shí)驗(yàn)原理和制定指標(biāo)密切相關(guān)，應(yīng)選擇背景資料清楚、影響因素少、檢測(cè)指標(biāo)靈敏和成本低廉的試驗(yàn)系統(tǒng)。應(yīng)盡可能研究各種因素對(duì)試驗(yàn)系的影響，采取必要的措施對(duì)影響因素進(jìn)行控制。

如采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，盡可能使用小鼠和大鼠等來(lái)源多、成本低的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并說(shuō)明其種屬、品系、性別和年齡。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，應(yīng)遵循“優(yōu)化、減少、替代”的“3R”原則。供試品選擇 應(yīng)選擇工藝穩(wěn)定，質(zhì)量合格的供試品。若為飲片，應(yīng)基源原清楚。應(yīng)至少使用 3 批供試品。

供試品制備應(yīng)綜合考慮試驗(yàn)系、工藝和臨床應(yīng)用特點(diǎn)，以適宜的方式體現(xiàn)出中藥的活性。

標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌窐?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇 如采用生物效價(jià)測(cè)定法，應(yīng)有基本同質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)以測(cè)定供試品的相對(duì)效價(jià)，標(biāo)準(zhǔn)品的選擇應(yīng)一般首選中藥標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)，也可以考慮化學(xué)藥作為標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)。如采用生物活性限值測(cè)定法，可采用中藥成分或化學(xué)藥品作為方法可靠性驗(yàn)證用對(duì)照品。采用選擇的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌肺镔|(zhì)均應(yīng)有理論依據(jù)和（或）實(shí)驗(yàn)依據(jù)。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中采用的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返氖褂脩?yīng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定要求。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的效價(jià)賦值方式可采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與試驗(yàn)系反應(yīng)生物效應(yīng)的變化值或變化率作為確定效價(jià)單位（U）的依據(jù)，或采用其他適宜方式。

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)計(jì)原理 所選實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法的原理應(yīng)明確，所選擇的檢測(cè)指標(biāo)應(yīng)客觀、專屬性強(qiáng)，能夠體現(xiàn)供試品的功能與主治或藥理作用，應(yīng)充分說(shuō)明指標(biāo)選擇的合理性。

設(shè)計(jì)類型 應(yīng)在充分了解劑量-效應(yīng)曲線特征的基礎(chǔ)上選擇設(shè)計(jì)類型。如采用生物效價(jià)測(cè)定法，應(yīng)按中國(guó)藥典生物檢定統(tǒng)計(jì)法（通則 1431）的要求進(jìn)行設(shè)計(jì)。如采用生物活性限值測(cè)定法，試驗(yàn)設(shè)計(jì)可考慮設(shè)供試品組、陰性對(duì)照組或陽(yáng)性對(duì)照組，測(cè)定方法使用動(dòng)物模型時(shí)，應(yīng)考慮設(shè)置模型對(duì)照。重現(xiàn)性好的試驗(yàn)，也可以不設(shè)或僅在復(fù)試時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組。

劑量設(shè)計(jì)置 如采用生物效價(jià)測(cè)定法，供試品和標(biāo)準(zhǔn)品均采用多劑量組試驗(yàn)，并按生物檢定的要求進(jìn)行合理的劑量設(shè)置，使不同劑量之間的生物效應(yīng)有顯著性差異。如采用生物活性限值測(cè)定法，建議只設(shè)一個(gè)限值劑量，限值劑量應(yīng)以產(chǎn)生生物效應(yīng)為宜；但在方法學(xué)研究時(shí)，應(yīng)采用多劑量試驗(yàn)，充分說(shuō)明標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)定限值劑量的依據(jù)。

給藥途徑 一般應(yīng)與臨床用藥途徑一致。如采用不同的給藥途徑，應(yīng)說(shuō)明理由。給藥次數(shù) 根據(jù)藥效學(xué)研究合理設(shè)計(jì)給藥次數(shù)，可采用多次或單次給藥。指標(biāo)選擇 應(yīng)客觀、明確、專屬，與"功能主治"相關(guān)。

3. 結(jié)果與統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)應(yīng)符合生物統(tǒng)計(jì)要求。生物效價(jià)測(cè)定法應(yīng)符合生物檢定統(tǒng)計(jì)法（通則 1431）的要求，根據(jù)樣品測(cè)定結(jié)果的變異性決定效價(jià)范圍和可信限（FL%）限值；生物活性限值測(cè)定法，應(yīng)對(duì)誤差控制進(jìn)行說(shuō)明，明確試驗(yàn)成立的判定依據(jù)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并說(shuō)明具體的統(tǒng)計(jì)方法和選擇依據(jù)。

4. 判斷標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果判定

生物效價(jià)測(cè)定，應(yīng)按品種的效價(jià)范圍和可信限率（FL%）限值進(jìn)行結(jié)果判斷。生物活性限值測(cè)定，應(yīng)在規(guī)定的限值劑量下判定結(jié)果，初試結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義者，可判定為符合規(guī)定。初試結(jié)果沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義者，可增加樣本數(shù)進(jìn)行一次復(fù)試，復(fù)試時(shí)應(yīng)增設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組，復(fù)試結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定為符合規(guī)定，否則為不符合規(guī)定。可根據(jù)品種和方法的不同規(guī)定初試、復(fù)試的實(shí)驗(yàn)條件和判定標(biāo)準(zhǔn)。

方法學(xué)驗(yàn)證

對(duì)不同的測(cè)定方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)，可根據(jù)測(cè)定目的、方法的原理、方法的技術(shù)特點(diǎn)等設(shè)計(jì)具體的驗(yàn)證方案。

1. 測(cè)定方法影響因素考察

應(yīng)考察測(cè)定方法的各種影響因素，通過(guò)考察確定最佳的試驗(yàn)條件，以保證試驗(yàn)方法的專屬性和準(zhǔn)確性。根據(jù)對(duì)影響因素考察結(jié)果，規(guī)定方法的誤差控制限值或?qū)y(tǒng)計(jì)有效性進(jìn)行說(shuō)明。離體試驗(yàn)，應(yīng)適當(dāng)進(jìn)行體內(nèi)外試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性驗(yàn)證。

2. 精密度考察

應(yīng)至少進(jìn)行重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性考察。重復(fù)性 按確定的測(cè)定方法，至少用 3 批供試品、每批 3 次或同批供試品進(jìn)行 6 次測(cè)定試驗(yàn)后對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。生物活性測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果判斷應(yīng)基本一致。

中間精密度 考察實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部條件改變（如不同人員、不同儀器、不同工作日和實(shí)驗(yàn)時(shí)間）對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，至少應(yīng)對(duì)同實(shí)驗(yàn)室改變?nèi)藛T進(jìn)行考察。

重現(xiàn)性 生物活性測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果必須應(yīng)在 3 家以上實(shí)驗(yàn)室能夠重現(xiàn)。

3.方法適用性考察

按擬采用的生物活性測(cè)定方法和劑量對(duì) 10 批以上該產(chǎn)品進(jìn)行測(cè)定，以積累數(shù)據(jù)，考察質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中該測(cè)定項(xiàng)目的適用性。

起草單位：北京同仁堂研究院、中國(guó)食品藥品檢定研究院

聯(lián)系電話：13511070676

來(lái)源:藥典委