細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(征求意見(jiàn)稿)

一、前言

隨著細(xì)胞治療領(lǐng)域技術(shù)的發(fā)展和研究經(jīng)驗(yàn)的逐步積累，全球范圍內(nèi)細(xì)胞治療藥品的研發(fā)和申報(bào)數(shù)量不斷增加。按照藥品研發(fā)的規(guī)律，在臨床試驗(yàn)期間和上市后階段，細(xì)胞治療藥品可能由于提升產(chǎn)品質(zhì)量、擴(kuò)大生產(chǎn)產(chǎn)能、降低生產(chǎn)成本等原因發(fā)生一系列藥學(xué)變更。與傳統(tǒng)生物制品不同，細(xì)胞治療藥品結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)及細(xì)胞組成多樣、生產(chǎn)工藝復(fù)雜、質(zhì)量屬性表征手段有限、技術(shù)更新迅速，質(zhì)量屬性與臨床安全性、有效性的相關(guān)性仍在探索中，因此細(xì)胞治療藥品變更的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、變更分類、研究方案設(shè)計(jì)和實(shí)施等均存在較大挑戰(zhàn)。為指導(dǎo)申請(qǐng)人/持有人科學(xué)地開(kāi)展細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究，規(guī)范細(xì)胞治療藥品全生命周期的研究與管理，根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》、《藥品注冊(cè)管理辦法》和《藥品上市后變更管理辦法（試行）》等相關(guān)規(guī)定和要求，制定本技術(shù)指導(dǎo)原則。

由于細(xì)胞治療藥品的變更研究與其他生物制品存在一定差異，本指導(dǎo)原則基于當(dāng)前的科學(xué)認(rèn)知，結(jié)合細(xì)胞治療藥品的特性，重點(diǎn)從藥學(xué)研究的角度闡述變更研究的基本考慮，主要用于指導(dǎo)申請(qǐng)人/持有人開(kāi)展臨床試驗(yàn)至上市后階段的藥學(xué)變更研究。本指導(dǎo)原則不具有強(qiáng)制性，若有可替代或適用的其他研究方法，或有不適用的內(nèi)容，申請(qǐng)人/持有人可提供相應(yīng)說(shuō)明及相關(guān)替代研究的支持理由和依據(jù)。本指導(dǎo)原則為細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究的一般性技術(shù)要求，僅反映現(xiàn)階段的認(rèn)知和觀點(diǎn)，隨著技術(shù)的發(fā)展、認(rèn)知的深入和經(jīng)驗(yàn)的積累，本指導(dǎo)原則內(nèi)容后續(xù)將逐步修訂和完善。

 二、適用范圍

本指導(dǎo)原則所述的細(xì)胞治療藥品是指源自人體（自體/異體）細(xì)胞或人源細(xì)胞系的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)體外操作，再輸入或植入到患者體內(nèi)，通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞的活性、免疫學(xué)特性和代謝狀態(tài)，和/或通過(guò)體內(nèi)細(xì)胞替換和功能重建發(fā)揮作用的藥品。例如嵌合抗原受體 T 細(xì)胞（Chimeric Antigen Receptor T-Cell，CAR-T）、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（Tumor Infiltrating Lymphocyte,TIL）、胰島細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、干細(xì)胞及其衍生細(xì)胞等。結(jié)合現(xiàn)階段細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究和審評(píng)經(jīng)驗(yàn)，本指導(dǎo)原則正文部分示例和附件內(nèi)容主要針對(duì)自體細(xì)胞治療藥品，對(duì)于間充質(zhì)細(xì)胞、通用 CAR-T 細(xì)胞、成體干細(xì)胞等其他異體細(xì)胞治療藥品，經(jīng)評(píng)估也可適當(dāng)參考。對(duì)于細(xì)胞與非細(xì)胞成分的組合產(chǎn)品，細(xì)胞衍生產(chǎn)品如細(xì)胞外囊泡、細(xì)胞裂解物、滅活細(xì)胞等，其細(xì)胞部分的藥學(xué)變更研究也可能適用于本指導(dǎo)原則。 

本指導(dǎo)原則不適用于輸血用的血液成分，已有規(guī)定的、未經(jīng)體外處理的造血干細(xì)胞移植，生殖細(xì)胞，以及由細(xì)胞組成的組織、器官類產(chǎn)品等。從根本上改變藥品設(shè)計(jì)或性質(zhì)的變更不包括在本指導(dǎo)原則的適用范圍內(nèi)，例如同種異體變更為自體供體、脂肪來(lái)源細(xì)胞變更為臍帶來(lái)源細(xì)胞等關(guān)鍵細(xì)胞起始物料的變更）；活性成分細(xì)胞類型的變更（如 CD4+T 細(xì)胞變更為 CD8+T 細(xì)胞）；目的基因序列的變更或目的基因的添加（如嵌合抗原受體的細(xì)胞外靶抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的變更）等。

三、一般原則

（一）基本原則

申請(qǐng)人/持有人是變更管理的責(zé)任主體，對(duì)變更研究及研究結(jié)果的評(píng)估負(fù)責(zé)。鼓勵(lì)申請(qǐng)人/持有人通過(guò)工藝優(yōu)化持續(xù)提高產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性，同時(shí)證明變更對(duì)產(chǎn)品的安全性、有效性和質(zhì)量可控性無(wú)不良影響。在遵循生物制品變更研究一般規(guī)律的基礎(chǔ)上，需在充分考慮細(xì)胞治療藥品特殊性的基礎(chǔ)上，開(kāi)展相應(yīng)的變更研究?；诩?xì)胞治療藥品技術(shù)迭代和研發(fā)流程的特點(diǎn)，鼓勵(lì)申請(qǐng)人/持有人基于“質(zhì)量源于設(shè)計(jì)”的研發(fā)理念，探索生產(chǎn)模式、生產(chǎn)用物料和生產(chǎn)工藝等各個(gè)藥學(xué)方面對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的影響。在早期研發(fā)階段探索并逐步明確產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，有利于更深入地理解產(chǎn)品質(zhì)量屬性與臨床安全性、有效性的相關(guān)性，也有利于評(píng)估變更對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的可能影響。在關(guān)鍵質(zhì)量屬性、臨床有效性不明確的情況下，建議對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行全過(guò)程控制。工藝優(yōu)化過(guò)程中，鼓勵(lì)申請(qǐng)人/持有人采用安全性更高的原材料和更安全的基因修飾系統(tǒng)，開(kāi)發(fā)密閉或半密閉的制備工藝，提高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)化分析方法等?；诩?xì)胞治療藥品的特殊性和變更研究的復(fù)雜性，建議在研發(fā)期間提早制定變更研究的研發(fā)計(jì)劃和策略，減少非預(yù)期變更對(duì)產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)程的影響。隨著研發(fā)數(shù)據(jù)的不斷積累，持續(xù)修訂和完善變更研究計(jì)劃。

考慮到細(xì)胞治療藥品的工藝特點(diǎn)、起始原材料的變異性和現(xiàn)有科學(xué)認(rèn)知的局限性等方面，原則上，應(yīng)在確證性臨床試驗(yàn)開(kāi)始前完成重大藥學(xué)變更，鎖定生產(chǎn)工藝，使確證性臨床試驗(yàn)階段的場(chǎng)地、產(chǎn)能、工藝、物料、檢測(cè)、質(zhì)量等方面與商業(yè)化生產(chǎn)密切銜接。一般不建議在確證性臨床試驗(yàn)完成后實(shí)施藥學(xué)重大變更，如有充分理由確需發(fā)生，應(yīng)開(kāi)展充分的可比性研究，并鼓勵(lì)與監(jiān)管機(jī)構(gòu)進(jìn)行溝通交流。根據(jù)細(xì)胞治療藥品變更所處研究階段的不同和藥學(xué)變更情況的差異，相應(yīng)的技術(shù)要求有所不同。如臨床試驗(yàn)期間發(fā)生的藥學(xué)變更，其研究與評(píng)估的重點(diǎn)為變更對(duì)受試者安全的影響和對(duì)臨床有效性分析的影響，根據(jù)評(píng)估結(jié)果可提出補(bǔ)充申請(qǐng)，批準(zhǔn)后實(shí)施，或經(jīng)評(píng)估后直接實(shí)施并在研發(fā)期間安全性更新報(bào)告中報(bào)告?？紤]到細(xì)胞治療藥品的復(fù)雜性，鼓勵(lì)收集更多變更后樣品的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)以評(píng)估變更的影響。上市后的藥學(xué)變更，按照藥學(xué)變更可能對(duì)細(xì)胞治療藥品安全性、有效性和質(zhì)量可控性的影響和程度，分為重大變更、中等變更、微小變更，并可根據(jù)規(guī)定的路徑進(jìn)行申報(bào)、備案或報(bào)告。

本指導(dǎo)原則的附錄例舉了自體細(xì)胞治療藥品部分上市后藥學(xué)變更事項(xiàng)，基于科學(xué)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估界定了具體變更事項(xiàng)的類別，供申請(qǐng)人/持有人參考。變更可比性研究是遞進(jìn)式的研究，目前細(xì)胞治療藥品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性仍在不斷完善中，其與體內(nèi)安全性和有效性之間的相關(guān)性尚需積累更多研究數(shù)據(jù)。申請(qǐng)人/持有人應(yīng)根據(jù)當(dāng)下的科學(xué)認(rèn)知、生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)、平臺(tái)知識(shí)等，系統(tǒng)性地評(píng)估擬引入藥學(xué)變更的風(fēng)險(xiǎn)并制定相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制措施，以保障產(chǎn)品質(zhì)量不受影響。當(dāng)藥學(xué)可比性研究數(shù)據(jù)顯示變更前、后產(chǎn)品的質(zhì)量屬性存在差異，且基于現(xiàn)有科學(xué)認(rèn)知認(rèn)為該差異可能對(duì)產(chǎn)品安全性、有效性有潛在影響，或者評(píng)估認(rèn)為藥學(xué)變更存在較大風(fēng)險(xiǎn)或不確定性，質(zhì)量研究手段尚無(wú)法充分評(píng)估變更前后的可比性時(shí)，都可能需要進(jìn)行非臨床試驗(yàn)和/或臨床的橋接研究。

（二）細(xì)胞治療藥品變更研究的特殊性

1、統(tǒng)籌性規(guī)劃、前瞻性計(jì)劃

細(xì)胞治療藥品的活性成分通常為高度“個(gè)性化”和“異質(zhì)性”的活細(xì)胞，生產(chǎn)工藝涉及細(xì)胞采集、分離純化、擴(kuò)增、活化或基因修飾等復(fù)雜操作，中間產(chǎn)品的質(zhì)量處于動(dòng)態(tài)變化中，工藝變更對(duì)細(xì)胞質(zhì)量的影響往往難以預(yù)測(cè)。相對(duì)于生產(chǎn)用物料質(zhì)量控制、工藝及產(chǎn)品質(zhì)量研究等方面較為成熟的傳統(tǒng)生物制品，細(xì)胞治療藥品生產(chǎn)使用的設(shè)備設(shè)施、耗材、原材料、生產(chǎn)工藝和分析方法等的變更均可能更大程度地影響生產(chǎn)工藝和/或藥品質(zhì)量。同時(shí)，由于該類藥品的質(zhì)量分析手段不僅受到細(xì)胞相關(guān)分析技術(shù)的限制，而且與工藝變更相關(guān)性關(guān)聯(lián)的藥品質(zhì)量屬性往往需要進(jìn)一步確認(rèn)或重新識(shí)別，當(dāng)藥學(xué)變更風(fēng)險(xiǎn)較大時(shí)，僅采用有限的質(zhì)量分析手段完成的質(zhì)量可比性研究往往很難確定變更前后細(xì)胞樣品的可比性，還可能需要重新驗(yàn)證產(chǎn)品的安全性和有效性。隨著技術(shù)的發(fā)展，新型的基因修飾系統(tǒng)及修飾工藝逐漸應(yīng)用于細(xì)胞治療藥品的 制備，自動(dòng)化生產(chǎn)設(shè)備和新型在線過(guò)程控制分析等創(chuàng)新技術(shù)的快速應(yīng)用可能為變更研究引入較多未知的風(fēng)險(xiǎn)因素。

基于細(xì)胞治療藥品變更研究的特殊性和復(fù)雜性，建議在研發(fā)期間對(duì)可能發(fā)生的藥學(xué)變更進(jìn)行預(yù)判，提早制定藥學(xué)變更研究的研發(fā)計(jì)劃和策略，減少非預(yù)期變更對(duì)研發(fā)進(jìn)程的影響。隨著研發(fā)數(shù)據(jù)的不斷積累，持續(xù)修訂和完善變更研究計(jì)劃。對(duì)于上市后變更，建議結(jié)合細(xì)胞治療藥品持續(xù)改進(jìn)、產(chǎn)品供應(yīng)等需求總體布局、統(tǒng)籌推進(jìn)各類藥學(xué)變更，合理制定變更研究策略并擬定科學(xué)的風(fēng)險(xiǎn)控制措施，從而更前瞻性地管理細(xì)胞治療藥品全生命周期的藥學(xué)變更。

2、細(xì)胞樣品異質(zhì)性和稀缺性的研究策略

細(xì)胞治療藥品的質(zhì)量屬性容易受到細(xì)胞本身的生物學(xué)變異性影響，供者的個(gè)體差異對(duì)細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量屬性、安全性或有效性的影響可能大于生產(chǎn)工藝變更相關(guān)變化的影響。對(duì)于自體細(xì)胞治療藥品，大部分供者細(xì)胞將用于產(chǎn)品制備，可用于變更研究的樣品稀缺，需要擬定相應(yīng)的變更可比性研究方案。該類藥品研發(fā)各階段難以建立標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品，需要結(jié)合分析方法研究等充分評(píng)估細(xì)胞樣品純度、生物學(xué)活性等檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此申請(qǐng)人/持有人在制定可比性研究策略時(shí)應(yīng)深入探索，盡可能考慮供者細(xì)胞個(gè)體間的差異、原材料的質(zhì)量變異性、工藝研究模型的代表性，并基于科學(xué)認(rèn)知，選擇與變更更為相關(guān)的質(zhì)量屬性，包括并不限于生物學(xué)屬性，必要時(shí)應(yīng)關(guān)注更有代表性的拓展表征屬性等，在完善相關(guān)方法學(xué)驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，開(kāi)展充分的可比性研究?？紤]到起始細(xì)胞原材料的稀缺性和質(zhì)量變異性，經(jīng)評(píng)估細(xì)胞治療藥品的變更研究通?？梢圆捎镁哂写硇缘奶娲鷺悠罚ㄈ缃】倒┱邩悠罚┻M(jìn)行。為了降低起始細(xì)胞原材料的異質(zhì)性對(duì)變更研究的影響，細(xì)胞治療藥品的可比性研究常采用相同供者來(lái)源的起始細(xì)胞等分（split-based approach）進(jìn)行頭對(duì)頭可比性研究?？杀刃栽u(píng)估時(shí)，可考慮結(jié)合變更程度、研究階段和統(tǒng)計(jì)學(xué)效力等合理設(shè)定研究用批次數(shù)量，并相應(yīng)采用配對(duì)檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

3、全生產(chǎn)流程變更風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及控制

細(xì)胞治療藥品的變更風(fēng)險(xiǎn)分析可能受限于當(dāng)前研發(fā)階段有限的研究數(shù)據(jù)、生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)以及科學(xué)認(rèn)知等，存在較大不確定性。例如細(xì)胞不能耐受終端滅菌、病毒滅活處理，變更無(wú)菌控制措施可能直接影響微生物安全性，需進(jìn)行充分的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。細(xì)胞治療藥品的制備工藝復(fù)雜，相關(guān)變更可能永久改變細(xì)胞的質(zhì)量特性（如 T 細(xì)胞耗竭狀態(tài)、干細(xì)胞分化能力或成瘤性改變等），并與安全性、有效性密切相關(guān)。細(xì)胞治療藥品通常對(duì)貯存和操作條件敏感，細(xì)胞活率或生物學(xué)活性可能隨著貯存時(shí)間延長(zhǎng)急劇下降，涉及中間產(chǎn)物儲(chǔ)存、容器封閉系統(tǒng)、成品儲(chǔ)存、運(yùn)輸及使用條件等方面的變更均可能影響產(chǎn)品質(zhì)量和穩(wěn)定性?？紤]到相關(guān)認(rèn)知仍處于逐步積累過(guò)程中，對(duì)于變更的影響往往難以預(yù)測(cè)，因而對(duì)變更的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和控制更具挑戰(zhàn)性。

因此申請(qǐng)人/持有人必須具備足夠的細(xì)胞治療藥品知識(shí)積累，具備風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)管控的能力。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方面，除了評(píng)估細(xì)胞治療藥品變更事項(xiàng)本身潛在的風(fēng)險(xiǎn)，還應(yīng)考慮執(zhí)行變更中伴隨的不確定風(fēng)險(xiǎn)?；诩?xì)胞治療藥品藥學(xué)變更的影響因素及范圍，申請(qǐng)人/持有人應(yīng)盡可能基于科學(xué)理論或?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)全面評(píng)估變更的風(fēng)險(xiǎn)，并適當(dāng)?shù)母采w可比性研究的深度以及范圍，開(kāi)展“全過(guò)程”藥學(xué)可比性研究。如適用，建議變更研究中深入開(kāi)展生產(chǎn)原材料對(duì)比研究、各工藝階段中間產(chǎn)品對(duì)比研究和細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量對(duì)比研究等，或根據(jù)變更風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估設(shè)計(jì)可比性研究方案，以保障變更前后的產(chǎn)品質(zhì)量具有可比性。制定風(fēng)險(xiǎn)控制措施時(shí)，建議考慮在預(yù)防性措施失效的情況下，現(xiàn)有的質(zhì)量控制策略是否可以及時(shí)監(jiān)測(cè)不良信號(hào)的發(fā)生，并具備快速反饋不良信號(hào)的機(jī)制，同時(shí)也應(yīng)關(guān)注新的風(fēng)險(xiǎn)控制手段是否會(huì)引入額外的產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。

四、藥學(xué)可比性研究技術(shù)要求

藥學(xué)可比性評(píng)估的目的在于確認(rèn)生產(chǎn)工藝變更前后的產(chǎn)品的質(zhì)量是否具有可比性?？杀刃匝芯康姆秶约吧疃葢?yīng)基于現(xiàn)有的科學(xué)理解以及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)論等合理制定，同時(shí)也應(yīng)該關(guān)注細(xì)胞層面可比性研究的受限因素。變更可比性研究策略的制定應(yīng)基于全方位的差異分析及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，需仔細(xì)分析變更事項(xiàng)對(duì)生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量可能造成的影響，并結(jié)合生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)以及對(duì)變更事項(xiàng)的科學(xué)理解等綜合評(píng)估。通常，細(xì)胞治療藥品可比性研究可采用兩種策略：變更前后批次的頭對(duì)頭對(duì)比分析（head-to-head or side-by190 side comparison）和變更后批次與變更前歷史批次數(shù)據(jù)的對(duì)比分析。

考慮到工藝和質(zhì)量分析等的變異性，頭對(duì)頭對(duì)比研究的變量較少且研究全過(guò)程基本可控，獲得的可比性研究結(jié)果更為真實(shí)可靠，更有助于得出明確的可比性研究結(jié)論。對(duì)于歷史批次對(duì)比的研究策略，由于變量較多，多變量的疊加可能會(huì)影響判斷分析，需要對(duì)可比性研究結(jié)果進(jìn)行謹(jǐn)慎地評(píng)估，評(píng)估時(shí)建議綜合考慮研究批次的選擇依據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法的適用性等。因此，如條件允許，建議申請(qǐng)人/持有人優(yōu)先采用頭對(duì)頭的可比性分析策略；同時(shí)，輔以與歷史批次的數(shù)據(jù)對(duì)比分析，包括評(píng)估分析方法、生產(chǎn)用物料、生產(chǎn)操作人員、生產(chǎn)設(shè)備等方面的差異對(duì)可比性分析的影響。變更可比性研究包括研究樣品的選擇、研究方案的設(shè)計(jì)、可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的制定、可比性研究數(shù)據(jù)分析等方面。研究樣品方面，建議結(jié)合產(chǎn)品特點(diǎn)和具體變更事項(xiàng)，選擇代表性樣品進(jìn)行可比性研究?？紤]到細(xì)胞治療藥品不同供者間起始原材料的差異，建議根據(jù)研究階段、變更事項(xiàng)和所用統(tǒng)計(jì)方法等具體情況，充分評(píng)估可比性研究樣品的代表性及批次數(shù)量的合理性。可比性研究方案可包括工藝可比性、產(chǎn)品質(zhì)量可比性和穩(wěn)定性可比性分析等。對(duì)于涉及工藝的變更，建議進(jìn)行工藝參數(shù)和過(guò)程輸出參數(shù)的比對(duì)?？稍谶m宜的關(guān)鍵生產(chǎn)階段設(shè)置留樣節(jié)點(diǎn)進(jìn)行變更前后可比性分析。例如，可以收集不同步驟對(duì)應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)物，進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)、活率等指標(biāo)的對(duì)比分析。質(zhì)量可比性分析方面，建議在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究項(xiàng)目的比對(duì)分析基礎(chǔ)上，進(jìn)行擴(kuò)展的質(zhì)量屬性（如細(xì)胞表型等）的比對(duì)分析。穩(wěn)定性對(duì)比研究方面，建議根據(jù)變更事項(xiàng)進(jìn)行評(píng)估，開(kāi)展代表性批次長(zhǎng)期、加速（如適用）、偏離預(yù)期貯藏運(yùn)輸（如適用）和臨床使用等條件下的比對(duì)分析，分析時(shí)選擇敏感的指標(biāo)，特別是經(jīng)評(píng)估有潛在影響的指標(biāo)?？杀刃匝芯客ㄟ^(guò)預(yù)設(shè)的可接受標(biāo)準(zhǔn)客觀評(píng)價(jià)變更前后產(chǎn)品質(zhì)量是否具有可比性。可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)制定時(shí)，可以結(jié)合研究階段、樣本（健康供者、患者）及樣本量等的具體情況，考慮采用變更前的工藝研究批次、臨床試驗(yàn)批次等歷史批次的數(shù)據(jù)（包括最大值、最小值、平均值、中位數(shù)等）進(jìn)行分析。

細(xì)胞治療藥品的質(zhì)量變異性較大，計(jì)算可驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)范圍時(shí)使用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法和統(tǒng)計(jì)過(guò)程可能更為復(fù)雜，需結(jié)合對(duì)比研究數(shù)據(jù)的分布、數(shù)據(jù)量合理設(shè)定統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。數(shù)據(jù)收集方面，建議盡可能收集變更前多個(gè)批次（檢測(cè)結(jié)果符合擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）的數(shù)據(jù)，避免選擇性挑取批次。數(shù)據(jù)分析時(shí)建議綜合考慮樣品來(lái)源（如患者、健康供者）及變更分組等具體情況對(duì)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)制定和可比性結(jié)果判斷的影響。當(dāng)現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)無(wú)法有效的評(píng)估變更內(nèi)容可能的影響時(shí)，比如有限的科學(xué)知識(shí)、有限的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)、有限的樣品數(shù)量、檢測(cè)方法本身的變異性和細(xì)胞本身的生物學(xué)變異性等。申請(qǐng)人/持有人應(yīng)全面評(píng)估變更的風(fēng)險(xiǎn)，并適當(dāng)?shù)臄U(kuò)大可比性研究的深度以及范圍，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品的特性、具體變更事項(xiàng)、研發(fā)階段等因素考慮合適的可比性研究策略，以保障變更前后的產(chǎn)品質(zhì)量具有可比性。

（一）生產(chǎn)工藝可比性研究

考慮到細(xì)胞藥品生產(chǎn)工藝的復(fù)雜性，工藝變更可比性研究可采取循序漸進(jìn)的方式，逐級(jí)分析變更對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的潛在影響，也可以根據(jù)積累的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和數(shù)據(jù)選取合適的研究策略或選擇適用于可比性分析的質(zhì)量屬性和工藝參數(shù)。細(xì)胞治療藥品常見(jiàn)的工藝變更包括原材料變更、工藝步驟及參數(shù)變更和產(chǎn)能變更等。

1、生產(chǎn)用原材料變更可比性研究

起始原材料方面，供者的個(gè)體差異對(duì)細(xì)胞終產(chǎn)品質(zhì)量屬性、安全性或有效性的影響可能大于生產(chǎn)工藝變更相關(guān)變化的影響。如發(fā)生供者細(xì)胞采集方法和相關(guān)試劑的變更，建議關(guān)注變更對(duì)供者細(xì)胞、后續(xù)工藝中間產(chǎn)品質(zhì)量的影響，結(jié)合工藝變更的程度及不同供者細(xì)胞的差異開(kāi)展相應(yīng)的變更研究。對(duì)于起始原材料是細(xì)胞系/株或細(xì)胞庫(kù)的細(xì)胞治療藥品，需要識(shí)別該原材料與終產(chǎn)品安全性和有效性相關(guān)的質(zhì)量特性，從而擬定合理的可比性研究策略。細(xì)胞治療藥品的生產(chǎn)用原材料成分復(fù)雜，病毒載體、磁珠、培養(yǎng)基等關(guān)鍵原材料的變更對(duì)于細(xì)胞終產(chǎn)品的組成和生物學(xué)活性等方面可能存在顯著的影響。如經(jīng)評(píng)估原材料工藝變更可能影響細(xì)胞的安全性和有效性時(shí)，原材料的變更研究中除開(kāi)展原材料本身的工藝、質(zhì)量等變更可比性研究外，還需要開(kāi)展細(xì)胞治療藥品可比性研究。

2、工藝變更可比性研究

對(duì)于工藝步驟和工藝參數(shù)的變更，研究時(shí)建議分析評(píng)估生產(chǎn)工藝變更對(duì)細(xì)胞樣品純度及雜質(zhì)、理化性質(zhì)和生物特性的影響程度，檢測(cè)分析方法的適用性和研究結(jié)果，結(jié)合生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行可比性分析。風(fēng)險(xiǎn)分析中除了評(píng)估工藝變更本身的影響，建議申請(qǐng)人/持有人研究變更對(duì)下游工藝的影響后續(xù)生產(chǎn)工序的潛在影響，以及對(duì)每個(gè)工藝相關(guān)質(zhì)量屬性的影響，例如對(duì)中間產(chǎn)品質(zhì)量、過(guò)程參數(shù)控制以及在某些情況下對(duì)其他特性分析項(xiàng)目的影響。這些研究有助于選擇可比性研究的檢測(cè)指標(biāo)，篩選需重新評(píng)估的過(guò)程控制檢驗(yàn)項(xiàng)目、放行檢測(cè)的可接受標(biāo)準(zhǔn)或分析方法等。對(duì)于生產(chǎn)工藝變更后的工藝的過(guò)程控制，建議評(píng)估進(jìn)行確認(rèn)、部分修改或重新設(shè)置，以保障產(chǎn)品質(zhì)量。在工藝可比性研究結(jié)果的評(píng)估中，建議申請(qǐng)人/持有人全面收集相關(guān)數(shù)據(jù)，包括與質(zhì)量屬性相關(guān)的適宜理化特性和生物特性的特性分析數(shù)據(jù)，使用生產(chǎn)工藝中具有代表性的樣品（如中間產(chǎn)品、目標(biāo)細(xì)胞、最終產(chǎn)品等）的分析結(jié)果，工藝驗(yàn)證批次的數(shù)據(jù)，歷史上生產(chǎn)工藝變更時(shí)所發(fā)現(xiàn)的質(zhì)量屬性波動(dòng)與有效性和安全性之間關(guān)聯(lián)性的知識(shí)（例如細(xì)胞純度和分化、衰老狀態(tài)以及細(xì)胞分泌因子能力）等。另外，為了解生產(chǎn)工藝變更對(duì)最終產(chǎn)品的有效性、安全性和質(zhì)量的影響，建議申請(qǐng)人/持有人考慮尋找和測(cè)定新變化因素或新的質(zhì)量屬性指標(biāo)的必要性，關(guān)注生產(chǎn)工藝中影響產(chǎn)品特性的關(guān)鍵控制點(diǎn)（例如細(xì)胞分選工藝等）和工藝控制策略的合理性。如現(xiàn)有的生產(chǎn)過(guò)程以及質(zhì)量屬性檢測(cè)無(wú)法有效的得出變更前后產(chǎn)品可比的結(jié)論，也可考慮使用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以外的其他檢測(cè)手段來(lái)增加可比性研究的穩(wěn)健性，還可以結(jié)合生產(chǎn)工藝原理是否存在差異等其他因素綜合評(píng)估變更可比性。

3、生產(chǎn)模式及產(chǎn)能變更研究

細(xì)胞治療藥品的生產(chǎn)可能存在不同生產(chǎn)模式，如按工藝步驟或按批次劃分生產(chǎn)區(qū)域等不同的情形。產(chǎn)能擴(kuò)大策略包括增加批生產(chǎn)量（scale-up）和增加生產(chǎn)頻次但保持生產(chǎn)工藝、批生產(chǎn)量不變（scale-out）等不同情況。因此，針對(duì)產(chǎn)能變更，常見(jiàn)的方式有增加場(chǎng)地和增加生產(chǎn)頻次，考慮到不同產(chǎn)品的生產(chǎn)模式存在差異， 根據(jù)產(chǎn)品所處階段合理開(kāi)展產(chǎn)能確認(rèn)或驗(yàn)證研究， 鼓勵(lì)在開(kāi)展研究前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)進(jìn)行溝通交流?？紤]自體細(xì)胞治療藥品具有工藝特殊性以及批量小、生產(chǎn)頻次高等特點(diǎn),需結(jié)合產(chǎn)能擴(kuò)大策略對(duì)應(yīng)開(kāi)展產(chǎn)能確認(rèn)研究。

4、自體細(xì)胞治療藥品的變更研究

自體細(xì)胞治療藥品的起始細(xì)胞來(lái)自不同供者，且存在醫(yī)療機(jī)構(gòu)端供者細(xì)胞采集過(guò)程，不同供者細(xì)胞的組成、擴(kuò)增能力和其他質(zhì)量屬性均可能存在差異。供者細(xì)胞采集和處理過(guò)程相關(guān)的變更研究可能使用不同供者的樣品，供者細(xì)胞的個(gè)體差異使得變更研究相對(duì)復(fù)雜。選擇研究樣品時(shí)建議考慮患者來(lái)源細(xì)胞與健康供者細(xì)胞的差異?？紤]到一些情況下健康供者細(xì)胞不能準(zhǔn)確體現(xiàn)變更對(duì)患者來(lái)源細(xì)胞的影響，建議細(xì)胞數(shù)量充足時(shí)，經(jīng)過(guò)充分的知情同意優(yōu)先采用剩余的患者來(lái)源細(xì)胞進(jìn)行研究。如果采用健康供者細(xì)胞進(jìn)行研究，建議結(jié)合對(duì)健康供者和患者細(xì)胞生產(chǎn)過(guò)程中的參數(shù)控制、過(guò)程樣品檢測(cè)、產(chǎn)品質(zhì)量屬性數(shù)據(jù)等進(jìn)行總結(jié)和比較，說(shuō)明工藝的穩(wěn)健性及健康供者細(xì)胞的代表性。建議將同一供者起始細(xì)胞一分為二后分別生產(chǎn)，開(kāi)展配對(duì)可比性研究。同時(shí)，建議考慮采用配對(duì)檢驗(yàn)（paired difference）統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行可比性研究評(píng)估。

（二）質(zhì)量可比性研究

1、質(zhì)量研究

為了更好地分析評(píng)估藥學(xué)變更對(duì)細(xì)胞治療藥品質(zhì)量的可能影響，需要采用代表性樣品開(kāi)展充分的質(zhì)量研究。建議使用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行質(zhì)量屬性分析，包括純度、雜質(zhì)、含量測(cè)定、生物學(xué)活性、多種細(xì)胞功能（如適用）、免疫學(xué)性質(zhì)（如適用）和污染物等。一些細(xì)胞治療藥品目前缺乏明確的可以認(rèn)為與體內(nèi)作用直接相關(guān)的或?qū)Π踩院陀行灾苯酉嚓P(guān)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，因此可比性研究可能需要進(jìn)行更多質(zhì)量屬性的比對(duì)分析。考慮到產(chǎn)品細(xì)胞組成復(fù)雜，建議開(kāi)展對(duì)不同亞型、活性和代謝狀態(tài)的細(xì)胞亞群等的檢測(cè)分析，深入研究細(xì)胞樣品目的細(xì)胞群和非目的細(xì)胞群的變化等。另外，該類產(chǎn)品通常具有多元化作用機(jī)制（Mechanism of Action，MOA），研究時(shí)需要建立可精確、穩(wěn)定的反映作用機(jī)制的生物學(xué)活性分析方法，在可能的范圍內(nèi)評(píng)估變更前后樣品活性的變化。為了評(píng)估生產(chǎn)工藝變更對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，需仔細(xì)考慮生產(chǎn)工藝與質(zhì)量屬性相關(guān)的所有可預(yù)期的變化。例如建議評(píng)估變更細(xì)胞分選工藝前后產(chǎn)品的目標(biāo)細(xì)胞種類、含量和非目標(biāo)細(xì)胞/有害細(xì)胞的種類、含量是否保持在一定范圍內(nèi)。如果檢測(cè)到新的非目標(biāo)細(xì)胞，需要分析其來(lái)源，對(duì)細(xì)胞類型和含量進(jìn)行檢測(cè)，研究其對(duì)產(chǎn)品安全性和有效性的影響。對(duì)于生產(chǎn)用原材料和輔料的變更，如檢測(cè)到新的非細(xì)胞雜質(zhì)或污染物，需研究明確其類型和含量。對(duì)于上述發(fā)現(xiàn)的新雜質(zhì)，必要時(shí)需要進(jìn)行非臨床或臨床試驗(yàn)，以確認(rèn)新雜質(zhì)對(duì)產(chǎn)品安全性和有效性的影響。在充分的質(zhì)量研究的基礎(chǔ)上，對(duì)工藝研究數(shù)據(jù)、研發(fā)各階段質(zhì)量分析數(shù)據(jù)等合理進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，建立可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，從而根據(jù)現(xiàn)有知識(shí)充分保證變更不會(huì)對(duì)最終產(chǎn)品的有效性和安全性產(chǎn)生不利影響。一般來(lái)說(shuō)，首先積累生產(chǎn)工藝變更前后產(chǎn)品質(zhì)量的相關(guān)數(shù)據(jù)。然后，通過(guò)綜合評(píng)估，對(duì)所有質(zhì)量評(píng)估數(shù)據(jù)，例如常規(guī)批次分析、過(guò)程控制檢驗(yàn)、生產(chǎn)工藝驗(yàn)證、特性分析以及穩(wěn)定性數(shù)據(jù)等進(jìn)行分析，開(kāi)展變更前后樣品對(duì)比研究。根據(jù)可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行比較研究，客觀地評(píng)估變更前后產(chǎn)品的可比性。在這種情況下，對(duì)于作為可比性判定依據(jù)的質(zhì)量屬性，根據(jù)其與安全性、有效性的關(guān)系或影響的嚴(yán)重性來(lái)確定各質(zhì)量屬性的優(yōu)先級(jí)。

2、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的檢測(cè)項(xiàng)目和分析方法是為了確認(rèn)每批產(chǎn)品的質(zhì)量符合放行要求，并不能涵蓋細(xì)胞治療藥品的全部質(zhì)量屬性。因此僅使用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目對(duì)比通常不足以判定變更對(duì)產(chǎn)品的影響。雖然符合放行標(biāo)準(zhǔn)，但如果得到的結(jié)果顯示出偏離以往實(shí)際生產(chǎn)數(shù)據(jù)的趨勢(shì)，則產(chǎn)品可能發(fā)生了變化，因此可能需要進(jìn)行新的分析。如果獲得的數(shù)據(jù)或信息表明變更前設(shè)定的檢測(cè)項(xiàng)已經(jīng)不再適合對(duì)變更后產(chǎn)品的批次分析，則應(yīng)考慮變更、刪除檢測(cè)項(xiàng)或增加新的檢測(cè)項(xiàng)。在研究生產(chǎn)工藝變更后產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，建議參考 ICH Q6B 等指導(dǎo)原則中質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定的基本原則，結(jié)合已驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝、質(zhì)量特性分析數(shù)據(jù)、批分析數(shù)據(jù)、穩(wěn)定性數(shù)據(jù)、非臨床和臨床數(shù)據(jù)等進(jìn)行綜合評(píng)估。

對(duì)于質(zhì)量可比性研究的可接受標(biāo)準(zhǔn)（可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)），建議根據(jù)研發(fā)階段、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及歷史數(shù)據(jù)等，設(shè)定合理的可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)以評(píng)估變更前后產(chǎn)品的質(zhì)量可比性。基于變更風(fēng)險(xiǎn)和質(zhì)量屬性特點(diǎn)等評(píng)估，可比性結(jié)果的分析可存在多種方式，例如可采用數(shù)據(jù)或圖形展示等直接比較的方式進(jìn)行變更前后產(chǎn)品質(zhì)量的比較。針對(duì)已有一定數(shù)據(jù)積累的臨床試驗(yàn)后期的變更，通常需采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法?？煽紤]采用對(duì)歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析（Quality Range）、等效法（Equivalence）等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法定義可比性驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。如果采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法制定可接受標(biāo)準(zhǔn)范圍，需說(shuō)明統(tǒng)計(jì)方法的合理性。當(dāng)需要直接比較變更前和變更后的數(shù)值并確定它們是否足夠相似時(shí)，等效法通常適用于評(píng)估 CQA的可比性。對(duì)于正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，等效界值應(yīng)定義為總體平均值的最大可接受差異，超過(guò)這個(gè)限度將被認(rèn)為變更后的生產(chǎn)工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有不利影響。當(dāng)樣本量有限，質(zhì)量屬性變化很大或數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布時(shí)，采用統(tǒng)計(jì)方法以證明變更前后產(chǎn)品的可比性具有挑戰(zhàn)性。無(wú)論使用何種方法，理想情況下，可比性可接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)基于屬性對(duì)產(chǎn)品安全性和有效性的潛在影響的理解，而不僅是基于變更前產(chǎn)品的歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。如果有臨床或生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)表明 CQA 的差異會(huì)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生影響，則應(yīng)使用此信息為可比性研究選擇適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量范圍或等效界值。相反，如果申請(qǐng)人/持有人使用歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析來(lái)定義可比性可接受標(biāo)準(zhǔn)（例如，基于標(biāo)準(zhǔn)偏差），則應(yīng)論證基于統(tǒng)計(jì)的可接受標(biāo)準(zhǔn)如何足以確保變更后產(chǎn)品的安全性和有效性（即證明基于統(tǒng)計(jì)的參數(shù)與生物學(xué)上有意義的差異如何相關(guān)）。鼓勵(lì)申請(qǐng)人/持有人在臨床試驗(yàn)期間和產(chǎn)品上市后持續(xù)收集臨床數(shù)據(jù)，探索臨床安全性、有效性和藥學(xué)數(shù)據(jù)的相關(guān)性，結(jié)合積累的研究數(shù)據(jù)，定期進(jìn)行回溯性質(zhì)量趨勢(shì)分析， 進(jìn)一步修訂和完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3、分析方法

為了在可能的范圍內(nèi)涵蓋理化性質(zhì)和生物特性，如果可能，應(yīng)用多種分析手段獲得可靠性更高的評(píng)估結(jié)果，盡可能采用基于不同原理的理化/生物學(xué)分析方法，收集與同一質(zhì)量屬性相關(guān)的參數(shù)的數(shù)據(jù)，以便最大限度地識(shí)別到因生產(chǎn)工藝 變更而產(chǎn)生的產(chǎn)品變化。由于分析方法的局限性（如精密度、專屬性、耐用性、檢測(cè)限等）使得復(fù)雜性增加，為生產(chǎn)工藝變更前的產(chǎn)品設(shè)定的一系列分析方法可能很難檢測(cè)到產(chǎn)品的變化。因此，建議申請(qǐng)人/持有人關(guān)注以下幾個(gè)方面：

（1）所有用于證明可比性的放行分析方法都應(yīng)經(jīng)過(guò)確認(rèn)或驗(yàn)證。用于擴(kuò)展表征的分析法不一定需要經(jīng)過(guò)確認(rèn)，但應(yīng)科學(xué)合理并適合其預(yù)期用途，足夠精確以檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量的重大差異，并提供可靠的結(jié)果。

（2）現(xiàn)有的檢測(cè)方法針對(duì)其預(yù)期使用是否仍然適合或者是否應(yīng)對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行優(yōu)化。如果現(xiàn)有方法無(wú)法測(cè)定質(zhì)量屬性的變化，需要開(kāi)發(fā)新的檢測(cè)方法。如果合理地預(yù)測(cè)到工藝變更（例如，原材料的變更，細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)工藝的部分變更）的結(jié)果可能會(huì)對(duì)最終產(chǎn)品的質(zhì)量屬性產(chǎn)生重大但無(wú)法用現(xiàn)有方法測(cè)定的變化，則需要開(kāi)發(fā)新的適當(dāng)?shù)姆治龇椒?。在這種情況下，適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ遣捎脙?yōu)于現(xiàn)有特性分析或常規(guī)檢驗(yàn)（標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試、過(guò)程控制檢驗(yàn)等）所用分析方法的方法。

（3）由于技術(shù)的進(jìn)步和/或?qū)ψ饔脵C(jī)制的理解不斷加深，分析方法通常會(huì)在細(xì)胞治療藥品生命周期過(guò)程中變更、增加或轉(zhuǎn)移至新場(chǎng)地。為了提供支持可比性研究有力的數(shù)據(jù)，建議對(duì)變更前和變更后的產(chǎn)品屬性執(zhí)行頭對(duì)頭檢驗(yàn)，或使用在同一檢驗(yàn)場(chǎng)地中執(zhí)行的相同分析方法分析所有樣品。如果適用，也應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)品。在產(chǎn)品生命周期的所有階段，當(dāng)變更分析方法或?qū)⒎治龇椒ㄞD(zhuǎn)移至新的檢驗(yàn)場(chǎng)地時(shí)，應(yīng)該對(duì)分析方法變更進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以確定是否對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)估有潛在影響，包括是否對(duì)可比性研究的評(píng)估有潛在影響。例如，將 ELISA 試劑盒的手動(dòng)方法變更為自動(dòng)方法可能會(huì)導(dǎo)致靈敏度或精密度出現(xiàn)顯著差異。應(yīng)通過(guò)每種分析方法檢測(cè)相同的樣品來(lái)評(píng)估新舊分析方法的等效性。同樣，當(dāng)在多個(gè)場(chǎng)地進(jìn)行相同的檢測(cè)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法轉(zhuǎn)移研究以確?？芍貜?fù)性，并且檢測(cè)應(yīng)包括相同的樣品或共同的標(biāo)準(zhǔn)品以確保檢測(cè)結(jié)果的一致性。將分析方法轉(zhuǎn)移到新場(chǎng)地后，也可能需要進(jìn)行額外的分析方法確認(rèn)或驗(yàn)證。

4、質(zhì)量可比性研究結(jié)果

質(zhì)量可比性研究結(jié)果可能包括以下三類情況：

（1）根據(jù)當(dāng)前科學(xué)技術(shù)水平，對(duì)相關(guān)質(zhì)量屬性進(jìn)行對(duì)比的結(jié)果顯示變更前后產(chǎn)品的質(zhì)量相似性較高，認(rèn)為該變更不會(huì)影響保證產(chǎn)品有效性和安全性所必需的質(zhì)量屬性（關(guān)鍵質(zhì)量屬性），即可比，不會(huì)對(duì)有效性和安全性產(chǎn)生不利影響。

（2）如果變更前后的產(chǎn)品具有較高的質(zhì)量相似性，但使用的分析方法不能充分識(shí)別可能影響該產(chǎn)品有效性和安全性的變化，則應(yīng)考慮進(jìn)行額外的質(zhì)量研究（如表征或雜質(zhì)分析），以獲得明確的結(jié)論。在可能的范圍內(nèi)，對(duì)確證性臨床試驗(yàn)中所用批次或采用與所用批次相同的生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的批次預(yù)先進(jìn)行深入、全面的特性分析，有助于后續(xù)的可比性評(píng)估。

（3）雖然變更前后的產(chǎn)品具有較高的質(zhì)量相似性，但通過(guò)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量屬性的對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)了差異，且不能排除對(duì)有效性和安全性產(chǎn)生不良影響的可能性。在這種情況下，僅收集和分析質(zhì)量屬性的補(bǔ)充數(shù)據(jù)，認(rèn)為不足以支持變更或者經(jīng)可比性研究或評(píng)估認(rèn)為風(fēng)險(xiǎn)較大。因此，應(yīng)考慮進(jìn)行一定程度的非臨床試驗(yàn)和/或臨床試驗(yàn)，以評(píng)估可比性，具體研究?jī)?nèi)容可與監(jiān)管機(jī)構(gòu)溝通交流。

（三）穩(wěn)定性可比性研究

細(xì)胞治療藥品的貯存條件包括冷藏、冷凍、常溫等多種條件。細(xì)胞治療藥品通常對(duì)儲(chǔ)存和處理?xiàng)l件敏感。生產(chǎn)工藝變更，包括生產(chǎn)過(guò)程、中間體存放、原液或制劑的運(yùn)輸與貯存方式的變更，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞治療藥品的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響。當(dāng)生產(chǎn)工藝發(fā)生變化時(shí)，即使這些變化是生產(chǎn)工藝的微小變更，也可能影響變更后最終產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性。研究時(shí)需要充分評(píng)估變更對(duì)細(xì)胞治療藥品穩(wěn)定性的潛在影響，結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果設(shè)計(jì)合理的穩(wěn)定性可比性研究方案。當(dāng)病毒載體等生產(chǎn)用關(guān)鍵原材料變更時(shí)，變更前后原材料自身的穩(wěn)定性變化也需要研究。當(dāng)對(duì)可能引起目標(biāo)細(xì)胞的特性或含量、或者非目標(biāo)細(xì)胞譜或非細(xì)胞雜質(zhì)譜變化的生產(chǎn)工藝進(jìn)行變更時(shí)，建議評(píng)估對(duì)終產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響。穩(wěn)定性對(duì)比研究方面，建議采用同材質(zhì)包裝容器開(kāi)展代表性批次長(zhǎng)期、加速、運(yùn)輸及使用條件下的穩(wěn)定性研究項(xiàng)目的全面比對(duì)分析，考察條件應(yīng)能代表實(shí)際最差條件。加速穩(wěn)定性研究可能有助于確定能夠表征穩(wěn)定性的屬性，但基于目前的科學(xué)認(rèn)知，變更后細(xì)胞治療藥品的有效期應(yīng)基于長(zhǎng)期儲(chǔ)存條件下獲得的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)擬定。如涉及運(yùn)輸條件的改變，應(yīng)開(kāi)展相應(yīng)的運(yùn)輸驗(yàn)證研究。細(xì)胞治療藥品的生產(chǎn)變更也可能影響制劑與給藥裝置的相容性。在評(píng)估生產(chǎn)變更的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，建議申請(qǐng)人/持有人判斷是否需要進(jìn)行穩(wěn)定性和/或給藥裝置相容性研究以評(píng)估變更對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，以及此類研究是否采用中間過(guò)程產(chǎn)物、原液或制劑進(jìn)行評(píng)估。

五、其他方面的考慮

在細(xì)胞治療藥品的研發(fā)過(guò)程中，申請(qǐng)人或持有人應(yīng)根據(jù)研發(fā)階段和具體變更事項(xiàng)進(jìn)行詳細(xì)的變更風(fēng)險(xiǎn)分析，并遵循基于風(fēng)險(xiǎn)的原則設(shè)計(jì)相應(yīng)的變更前后的非臨床和/或臨床橋接研究。在進(jìn)行變更前后的非臨床和/或臨床橋接研究設(shè)計(jì)時(shí)，推薦采用遞進(jìn)式的研究策略。

首先，通過(guò)分析藥學(xué)可比性研究評(píng)估變更前后的可比性，若藥學(xué)可比性研究數(shù)據(jù)不足以排除潛在風(fēng)險(xiǎn)或變更可能引入不確定的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，非臨床研究可用以進(jìn)一步評(píng)估藥學(xué)變更對(duì)安全性和有效性的影響。例如，若變更涉及關(guān)鍵原材料、生產(chǎn)工藝或細(xì)胞培養(yǎng)條件的調(diào)整等，非臨床研究可以幫助評(píng)估其對(duì)產(chǎn)品生物學(xué)活性、免疫原性等安全性指標(biāo)的影響，也可以評(píng)估變更對(duì)產(chǎn)品體內(nèi)存續(xù)時(shí)間和分布行為、分化狀態(tài)的影響，以及對(duì)系統(tǒng)毒性的影響等。在非臨床研究的基礎(chǔ)上，若仍存在不確定性，臨床橋接研究可以進(jìn)一步驗(yàn)證變更后產(chǎn)品的安全性和有效性。在規(guī)劃變更前后的非臨床和/或臨床橋接研究時(shí)，應(yīng)綜合考慮產(chǎn)品類型特點(diǎn)、質(zhì)量屬性差異、質(zhì)量屬性與安全性/有效性的關(guān)聯(lián)、現(xiàn)有的非臨床/臨床數(shù)據(jù)等，以確保變更后的產(chǎn)品在安全性和有效性上與原產(chǎn)品具有足夠的可比性。

對(duì)于臨床試驗(yàn)期間的細(xì)胞治療藥品，若可比性結(jié)果顯示藥學(xué)變更對(duì)臨床試驗(yàn)的安全性或有效性可能產(chǎn)生負(fù)面影響（如改變免疫原性、產(chǎn)生新雜質(zhì)等），或當(dāng)特定的質(zhì)量屬性與安全性及有效性之間的關(guān)系尚未建立且變更前后產(chǎn)品質(zhì)量屬性存在差異時(shí)，需要進(jìn)行變更前后的非臨床和/或臨床橋接研究。例如，若藥學(xué)比對(duì)發(fā)現(xiàn)變更導(dǎo)致了細(xì)胞治療藥品的生物學(xué)活性、免疫原性或雜質(zhì)譜的改變，則可能需要開(kāi)展相應(yīng)的非臨床研究，如細(xì)胞毒性、刺激試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)等，以評(píng)估變更對(duì)產(chǎn)品安全性的影響。如果藥學(xué)可比性研究和/或非臨床可比性研究不足以確保該變更不會(huì)對(duì)安全性產(chǎn)生不利影響，可在適用時(shí)通過(guò)藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)（PK/PD）研究為可比性提供證據(jù)。

如果上述藥學(xué)可比性研究、非臨床研究、PK/PD 研究等均無(wú)法充分證實(shí)變更前后的可比性，申請(qǐng)人或持有人應(yīng)與監(jiān)管方溝通其對(duì)變更后產(chǎn)品的額外臨床研究計(jì)劃，可能包括進(jìn)行新的臨床研究和/或在正在進(jìn)行的臨床研究中增加額外的安全性或有效性評(píng)估。例如，可能需要考慮擴(kuò)大特別關(guān)注的不良事件范圍、使用變更前后產(chǎn)品的受試者交替入組、修改研究終止標(biāo)準(zhǔn)、增加使用變更后產(chǎn)品受試者數(shù)量以及開(kāi)展額外的劑量探索研究或安全性有效性研究等。如果希望將接受變更前/后產(chǎn)品的受試者的臨床數(shù)據(jù)匯總，應(yīng)充分證明變更前后可比性，并證明該臨床研究設(shè)計(jì)適合數(shù)據(jù)匯總分析，建議事先與監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)變更前后臨床數(shù)據(jù)匯總分析計(jì)劃進(jìn)行溝通。

對(duì)于已上市細(xì)胞治療藥品，若變更前后產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝、質(zhì)量和穩(wěn)定性研究足以證明可比，則無(wú)需對(duì)變更后產(chǎn)品實(shí)施非臨床和/或臨床研究。但當(dāng)特定質(zhì)量屬性與安全性和有效性之間的關(guān)系尚未確定，且觀察到變更前后產(chǎn)品的質(zhì)量屬性存在差異的情況下，應(yīng)實(shí)施非臨床和/或臨床橋接性或確證性研究。確實(shí)需要開(kāi)展額外臨床研究時(shí)，具體研究?jī)?nèi)容應(yīng)與監(jiān)管機(jī)構(gòu)溝通交流。

六、參考文獻(xiàn)

1. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.藥品上市后變更管理辦法（試行）.2021.

2. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心.已上市生物制品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2021.

3. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心.臨床試驗(yàn)期間生物制品藥學(xué)研究和變更技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2024.

4. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心.自體細(xì)胞治療藥品細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究的問(wèn)題與解答.2023.

5. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心.體外基因修飾系統(tǒng)藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2022.

6. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心.免疫細(xì)胞治療藥品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2022.

7. 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局. 細(xì)胞治療藥品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2017.

8. PMDA Guideline for comparability of human cell-processproducts subject to changes in their manufacturing process.2024.

9. ICH Q5E: Comparability of Biotechnological BiologicalProducts Subject to Changes in their Manufacturing Process.2004.

10. ICH Q8R2: Pharmaceutical Development. 2009.

11. U.S.FDA. Manufacturing Changes and Comparability for Human Cellular and Gene Therapy Products. 2023.

12. EMA Questions and Answers Comparability Considerations for Advanced Therapy Medicinal Products (ATMP). 2019

 附件：自體細(xì)胞治療藥品上市后階段不同類別變更舉例

依據(jù)細(xì)胞治療藥品變更帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)和產(chǎn)生影響的程度，可將變更分為：重大變更、中等變更、微小變更，以下對(duì)不同風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)變更進(jìn)行舉例。由于細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更復(fù)雜多樣，對(duì)于本附件沒(méi)有涵蓋的內(nèi)容，鼓勵(lì)申請(qǐng)人/持有人就藥學(xué)變更類別和技術(shù)要求與藥品監(jiān)管部門(mén)溝通。

1.重大變更舉例

1.1 新增/變更病毒載體生產(chǎn)場(chǎng)地

伴隨工藝改變，經(jīng)評(píng)估可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的情況例如：在病毒載體包裝所需元件、CAR 序列及其啟動(dòng)子序列未發(fā)生改變的前提下，新增/變更病毒載體生產(chǎn)場(chǎng)地，伴隨生產(chǎn)工藝發(fā)生變更，如病毒載體生產(chǎn)用細(xì)胞由貼壁細(xì)胞變更為懸浮細(xì)胞；生產(chǎn)工藝增加純化步驟；生產(chǎn)規(guī)模擴(kuò)大；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生變更等。

1.2 新增細(xì)胞生產(chǎn)場(chǎng)地/生產(chǎn)線

新增細(xì)胞生產(chǎn)場(chǎng)地/生產(chǎn)線，且伴隨生產(chǎn)工藝的變更，經(jīng)評(píng)估可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的情況例如：增加或刪除細(xì)胞培養(yǎng)、分選、激活等步驟；更改細(xì)胞生產(chǎn)布局；關(guān)鍵生產(chǎn)設(shè)備工作原理變更等。

1.3 變更細(xì)胞關(guān)鍵原材料

細(xì)胞生產(chǎn)關(guān)鍵原材料發(fā)生變更，經(jīng)評(píng)估可能顯著影響產(chǎn)品質(zhì)量的變更，如細(xì)胞培養(yǎng)基主要成分改變，可能會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化；CAR-T 細(xì)胞生產(chǎn)用磁珠的成分改變，可能會(huì)影響到細(xì)胞的分選效率或是激活效果；細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中添加細(xì)胞因子的步驟及用量改變，可能會(huì)影響到細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和/或激活；直接接觸細(xì)胞的培養(yǎng)裝置的材質(zhì)及作用原理改變，可能會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)等。 

1.4 涉及活性或效價(jià)檢測(cè)的分析方法變更

慢病毒/細(xì)胞活性或效價(jià)檢測(cè)的分析方法變更，且變更后方法與變更前方法的原理不同，為重大變更事項(xiàng)。如 CAR-T細(xì)胞生物學(xué)活性檢測(cè)方法由檢測(cè) IFN-γ/LDH 釋放量變更為靶細(xì)胞裂解率。

2.中等變更

通過(guò)“鏡像”新增細(xì)胞生產(chǎn)場(chǎng)地/生產(chǎn)線以擴(kuò)大產(chǎn)能，且新生產(chǎn)場(chǎng)地/生產(chǎn)線與當(dāng)前生產(chǎn)場(chǎng)地布局一致、受控于同一質(zhì)量保證/質(zhì)量控制（QA/QC）體系，為中等變更事項(xiàng)。細(xì)胞生產(chǎn)工藝及過(guò)程控制不發(fā)生改變，僅在同一生產(chǎn)場(chǎng)地/生產(chǎn)線通過(guò)增加生產(chǎn)頻次以擴(kuò)大產(chǎn)能的情況，為中等變更事項(xiàng)。

“鏡像”設(shè)計(jì)是指在新車間建設(shè)時(shí)，完全復(fù)制現(xiàn)有成功車間的設(shè)計(jì)參數(shù)、設(shè)備配置、工藝流程及管理體系，形成“物理或邏輯上的對(duì)稱結(jié)構(gòu)”。這種設(shè)計(jì)模式強(qiáng)調(diào)：布局一致性（空間規(guī)劃、設(shè)備擺放、人流/物流路徑與原車間相同）；工藝同步性（生產(chǎn)工藝參數(shù)（如溫濕度、潔凈度、操作步驟）嚴(yán)格對(duì)齊）；設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化（使用相同品牌、型號(hào)的設(shè)備，減少調(diào)試差異）；文件通用性（SOP（標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程）、驗(yàn)證文件等可直接遷移使用）；物料一致性（原則上，物料不應(yīng)該發(fā)生變化）。

3.微小變更

3.1 新增工作種子庫(kù)

使用經(jīng)批準(zhǔn)的質(zhì)粒/慢病毒的質(zhì)粒工程菌/生產(chǎn)用細(xì)胞主種子庫(kù)，采用經(jīng)批準(zhǔn)的建庫(kù)方法新建工作種子庫(kù)，傳代代次不超過(guò)批準(zhǔn)的代次，為微小變更事項(xiàng)。

3.2 質(zhì)粒、慢病毒、細(xì)胞效期延長(zhǎng)

質(zhì)粒、慢病毒、細(xì)胞直接接觸的包裝材料和容器未變更，且貯藏條件未發(fā)生改變，長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究中截止到擬定/貯藏期有效期未觀察到顯著的變化以延長(zhǎng)質(zhì)粒、慢病毒、細(xì)胞效期，為微小變更事項(xiàng)。

來(lái)源：CDE

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