為確基因修飾類凍干制劑（如mRNA疫苗、病毒載體）在COP西林瓶中的極端溫度穩(wěn)定性，需設(shè)計多維度密封性驗證實驗，核心圍繞容器密封完整性（CCI） 在深低溫下的維持能力。以下為基于法規(guī)與技術(shù)的實驗設(shè)計要點:

COP西林瓶

一、實驗設(shè)計原則

法規(guī)依據(jù)

遵循USP<1207>、EudraLex Annex 1及日本藥典對CCI的要求，覆蓋從-80℃（超低溫冰箱）至-196℃（液氮）的存儲場景。

滿足基因治療產(chǎn)品對無菌性和活性保留的嚴苛標準（如EMA對AAV載體泄漏率≤10?? mbar·L/s的要求）。

材料特性適配

COP的低熱膨脹系數(shù)（7.0×10??/℃）與膠塞（溴丁基橡膠）匹配，避免溫度驟變導(dǎo)致密封失效。

利用COP的低溫抗裂性（斷裂強度達64.3 MPa，為玻璃瓶的5-10倍）抵抗凍融應(yīng)力。

?

 RTU免洗免滅COP西林瓶

二、核心驗證方法

1. 氦質(zhì)譜檢漏法（高精度定量）

步驟：

將COP西林瓶抽真空后注入氦氣（示蹤氣體），置于液氮（-196℃）中模擬極端存儲。

使用氦質(zhì)譜儀掃描瓶體與膠塞接口，檢測泄漏率（目標≤1×10?? mbar·L/s）。

優(yōu)勢：可檢出0.1 μm級微漏，靈敏度高于傳統(tǒng)方法103倍。

2. 真空衰減法（無損定性）

步驟：

將樣品放入真空腔，抽真空至5 mbar，監(jiān)測壓力回升速率（液氮存儲后測試）。

壓力變化>0.5 mbar/min判定為泄漏（依據(jù)ASTM F2338）。

適用場景：凍干粉灌裝后的在線快速檢測。

3. 染料滲透測試（可視化驗證）

步驟：

將COP西林瓶浸入熒光染料（如0.1%亞甲基藍溶液），施加-0.8 bar負壓，液氮冷凍24小時。

解凍后紫外燈檢查瓶內(nèi)染料滲透（陰性為通過）。

案例：AT-Closed Vial?技術(shù)通過-196℃/15個月染料測試，泄漏率為0%。

三、極端溫度模擬策略

1. 深低溫循環(huán)測試

2. 長期穩(wěn)定性驗證

存儲條件：

-80℃（6個月）、-196℃（12個月），定期取樣。

檢測指標：

CCI：氦泄漏率、真空維持能力。

產(chǎn)品活性：mRNA完整性（電泳）、病毒載體滴度（TCID??）

四、關(guān)鍵驗證指標與標準

五、質(zhì)量控制體系

過程分析技術(shù)（PAT）

激光焊接后實時監(jiān)測密封面微裂紋（光學(xué)相干斷層掃描）。

質(zhì)量源于設(shè)計（QbD）

設(shè)計空間覆蓋膠塞壓縮率（15-25%）、激光功率（30-50W）等參數(shù)，確保低溫密封魯棒性。

運輸模擬驗證

ISTA 3A標準模擬液氮運輸振動，驗證后泄漏率變化≤5%。

實施建議

分階段驗證：

研發(fā)階段：氦檢漏+染料滲透（覆蓋-196℃至40℃梯度）；

GMP生產(chǎn)：真空衰減法100%在線檢測+凍融循環(huán)抽檢。

設(shè)備選型：

選用集成液氮槽的氦質(zhì)譜儀（如Leybold Phoenix L300）及自動化真空衰減測試儀。

數(shù)據(jù)管理：

建立數(shù)字孿生模型，預(yù)測不同配方凍干粉（如LNP-mRNA）的長期CCI風(fēng)險。

COP西林瓶CDE登記號為A狀態(tài)

基因修飾類凍干制劑的COP西林瓶密封驗證，需以 “材料-工藝-極端環(huán)境”三元協(xié)同為核心：

材料端：利用COP與膠塞的熱膨脹匹配性（Δα<0.5×10??/℃）抵御相變應(yīng)力；

工藝端：激光焊接+伽馬輻照鍵合提升低溫密封強度；

驗證端：通過氦檢漏定量微漏、染料滲透定性定位、真空衰減在線監(jiān)控，構(gòu)建三重保障體系。唯有將深低溫驗證嵌入產(chǎn)品全生命周期，方能突破-196℃穩(wěn)定性瓶頸，為基因治療提供合規(guī)可靠的活性載體容器