1范圍

本指導(dǎo)原則為藥包材成品質(zhì)量控制中微生物檢測(cè)項(xiàng)目設(shè)置、方法建立、接受標(biāo)準(zhǔn)以及檢測(cè)頻次等提供指導(dǎo)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成必不可少的條款，其最新版本（包括所有增補(bǔ)版、勘誤表等形式）適用于本指導(dǎo)原則。

1101無(wú)菌檢查法

1105非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法

1106非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法

9203藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則

GB/T19973.1《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 微生物學(xué)方法 第1部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的確定》

3檢測(cè)項(xiàng)目

藥包材作為直接接觸藥品的包裝材料和容器，其微生物控制對(duì)于控制藥品微生物污染具有重要意義。藥包材成品的微生物檢測(cè)項(xiàng)目一般包括無(wú)菌檢查、生物負(fù)載測(cè)定和微生物限度檢查，不同供應(yīng)形式藥包材的相應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目如表1所示。

無(wú)菌藥包材一般直接用于無(wú)菌工藝生產(chǎn)的無(wú)菌藥品，藥包材生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對(duì)滅菌工藝進(jìn)行充分驗(yàn)證和精確控制，確保每批放行產(chǎn)品的無(wú)菌性。藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜對(duì)藥包材成品設(shè)置無(wú)菌檢查項(xiàng)目。

對(duì)于用于無(wú)菌藥品的非無(wú)菌藥包材成品，生物負(fù)載測(cè)定是對(duì)其存活微生物總數(shù)進(jìn)行測(cè)定的過(guò)程，生物負(fù)載測(cè)定數(shù)據(jù)有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)清洗和/或滅菌過(guò)程的開發(fā)、驗(yàn)證和常規(guī)控制。是否要對(duì)藥包材成品設(shè)置生物負(fù)載測(cè)定項(xiàng)目，一般由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。供需雙方宜基于質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的要求，根據(jù)產(chǎn)品特性、污染控制措施、歷史數(shù)據(jù)等綜合評(píng)估生物負(fù)載測(cè)定的必要性。需要指出的是，根據(jù)生物負(fù)載數(shù)據(jù)的具體使用目的，在進(jìn)行生物負(fù)載測(cè)定的基礎(chǔ)上，有時(shí)還需對(duì)生物負(fù)載進(jìn)行進(jìn)一步微生物鑒定。

用于非無(wú)菌藥品的非無(wú)菌藥包材，是否要對(duì)藥包材成品設(shè)置微生物限度檢查項(xiàng)目，一般由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定?？蓞⒖?/span>ICH Q6A等國(guó)內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則評(píng)估微生物限度檢查的必要性。

4檢測(cè)方法

本指導(dǎo)原則規(guī)定的檢測(cè)方法是以微生物繁殖為基礎(chǔ)的傳統(tǒng)培養(yǎng)方法。隨著微生物分析技術(shù)的迅速發(fā)展，一些快速或?qū)崟r(shí)檢測(cè)技術(shù)可引入到微生物質(zhì)量控制中。在采用新檢測(cè)技術(shù)時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同應(yīng)用場(chǎng)景參考相關(guān)指導(dǎo)原則進(jìn)行替代方法的驗(yàn)證，并對(duì)驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

4.1無(wú)菌檢查

藥包材無(wú)菌檢查可參照無(wú)菌檢查法（通則1101）進(jìn)行。

檢驗(yàn)數(shù)量一般參照無(wú)菌檢查法（通則1101）中的醫(yī)療器械。

無(wú)菌藥包材需要在潔凈區(qū)內(nèi)參與藥品的無(wú)菌加工，一般需對(duì)供試品的內(nèi)外表面進(jìn)行無(wú)菌檢查。鑒于藥包材的形制等與藥品不同，可按照如下方法或經(jīng)驗(yàn)證的其他方法進(jìn)行供試品處理及接種培養(yǎng)基，未列出的品種可參照進(jìn)行。

預(yù)灌封注射器、軟膏管、橡膠密封件等供試品 取供試品，必要時(shí)將其拆散或切碎，等量接種于各管足以浸沒(méi)供試品的適量培養(yǎng)基中。

塑料瓶、滴眼劑瓶、軟袋等供試品 取供試品，分別用沖洗液充分沖洗供試品內(nèi)外表面，將沖洗液合并，然后參照無(wú)菌檢查法（通則1101）“水溶性液體供試品”項(xiàng)下方法操作。

4.2生物負(fù)載測(cè)定

4.2.1方法設(shè)計(jì)

4.2.1.1樣品數(shù)量

生物負(fù)載水平的常規(guī)監(jiān)測(cè)通常取3~10個(gè)供試品。

4.2.1.2樣品份額

一般采用整個(gè)供試品進(jìn)行生物負(fù)載測(cè)定。若存在實(shí)驗(yàn)室容器難以容納整個(gè)供試品等情況，可使用代表性部分進(jìn)行，如片材類藥包材可依據(jù)表面積確定樣品份額。

4.2.1.3微生物采集

根據(jù)藥包材的形制，常用的微生物采集方法包括振搖法（機(jī)械或人工方式）、沖洗法、超聲波洗脫法、袋蠕動(dòng)法等，其中振搖法和沖洗法最為常用。一般可采用pH 7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液、0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液等洗脫液，必要時(shí)采用含表面活性劑（聚山梨酯80或卵磷脂）的洗脫液進(jìn)行藥包材微生物的采集。

4.2.1.4接種培養(yǎng)基

接種培養(yǎng)基的方法一般包括：薄膜過(guò)濾法、平板傾注法、平板涂布法。根據(jù)藥包材的低生物負(fù)載特性，接種培養(yǎng)基宜優(yōu)先采用薄膜過(guò)濾法。洗脫液過(guò)濾后，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

4.2.1.5微生物培養(yǎng)

培養(yǎng)條件應(yīng)在考慮可能存在的微生物類型后進(jìn)行選擇。藥包材不太可能受到專性厭氧菌的污染，可不考慮該測(cè)試。一般可將需氧菌、霉菌和酵母菌合并測(cè)試，將全部的供試液過(guò)濾到一張濾膜上，放置在合適的通用培養(yǎng)基上（如胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基），于兩個(gè)不同的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)（如30°C到35°C，20°C到25°C），或者其他經(jīng)驗(yàn)證的培養(yǎng)條件。其中培養(yǎng)基的配制、滅菌、貯藏以及質(zhì)量控制等宜符合非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則（9203）的要求。

4.2.1.6微生物計(jì)數(shù)

采用薄膜過(guò)濾法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，每張濾膜上的菌落數(shù)宜不超過(guò)50cfu。若供試品中所含的菌數(shù)較多時(shí)，供試液可酌情減量。以相當(dāng)于1個(gè)供試品的菌落數(shù)報(bào)告測(cè)定結(jié)果。

4.2.2方法驗(yàn)證

生物負(fù)載測(cè)定的方法驗(yàn)證有兩個(gè)方面需要考慮。一是評(píng)估測(cè)試方法的適用性，以證明測(cè)試過(guò)程對(duì)微生物無(wú)生長(zhǎng)抑制作用，可參考非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）進(jìn)行。二是評(píng)估測(cè)試方法的回收率，用回收率的校正因子對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正以補(bǔ)償無(wú)法完全從產(chǎn)品和/或微生物培養(yǎng)中采集的微生物數(shù)量，方法回收率試驗(yàn)一般采用人工接種產(chǎn)品的方式，可參考GB/T19973.1《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌微生物學(xué)方法第1部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的確定》進(jìn)行。

4.3微生物限度檢查

藥包材微生物限度檢查可參照非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）、非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）進(jìn)行，優(yōu)先采用薄膜過(guò)濾法。

容器類、實(shí)體類等供試品的檢驗(yàn)量不少于5個(gè)；片材類供試品的檢驗(yàn)量不少于500cm2（按單面計(jì)），取5等份，每份100cm2。

以相當(dāng)于1個(gè)或100cm2供試品的菌落數(shù)報(bào)告需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)結(jié)果，以相當(dāng)于1個(gè)或100cm2供試品中是否檢出控制菌報(bào)告控制菌檢查結(jié)果。

鑒于藥包材的形制等與藥品不同，可按照如下方法或經(jīng)驗(yàn)證的其他方法進(jìn)行供試液制備，未列出的品種可參照進(jìn)行。

容器類（瓶、管等）供試品取供試品，采用沖洗法，每個(gè)分別加入一定體積（依供試品標(biāo)示容量按比例確定）沖洗液，振搖一定時(shí)間，充分沖洗供試品內(nèi)腔，將沖洗液合并，即得供試液。在振搖之前，采用適宜的方式將供試品密閉（如將瓶蓋旋緊、用夾子將管尾端密閉等）。

實(shí)體類（密封件、墊片等）供試品取供試品，采用振搖法，合并供試品投入盛有一定體積（依供試品個(gè)數(shù)按比例確定）沖洗液的無(wú)菌容器中，振搖一定時(shí)間，充分沖洗供試品，即得供試液。必要時(shí)，可預(yù)先剪碎處理。視情況可分別沖洗供試品，將沖洗液合并，即得供試液。

片材類（鋁箔、膜、硬片等）供試品取供試品，采用振搖法，每份分別投入盛有一定體積（依供試品表面積按比例確定）沖洗液的無(wú)菌容器中，振搖一定時(shí)間，充分沖洗供試品，將沖洗液合并，即得供試液。必要時(shí)，可預(yù)先剪碎處理。視情況可合并供試品制備供試液。

6接受標(biāo)準(zhǔn)

6.1無(wú)菌檢查接受標(biāo)準(zhǔn)

無(wú)菌檢查接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合無(wú)菌檢查法（通則1101）的規(guī)定，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。

6.2生物負(fù)載水平

生物負(fù)載的可接受水平是基于生產(chǎn)過(guò)程正常運(yùn)行條件下收集到的歷史數(shù)據(jù)建立的，反映了生產(chǎn)過(guò)程的風(fēng)險(xiǎn)控制要求限值。同時(shí)，生物負(fù)載水平的建立也宜考慮隨后清洗和/或滅菌過(guò)程的經(jīng)濟(jì)性以及對(duì)藥品內(nèi)毒素水平的影響等。在滿足藥品安全性、有效性等方面考量的基礎(chǔ)上，一般由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。需要指出的是，一些特殊的藥包材需要在藥品生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行加工后使用，比如共擠膜加工成輸液袋等，其加工工藝可能會(huì)影響藥包材出廠時(shí)的生物負(fù)載水平，藥品生產(chǎn)企業(yè)宜對(duì)加工工藝帶來(lái)的生物負(fù)載水平的變化進(jìn)行合理評(píng)估。

6.3微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

微生物限度檢查一般包括微生物計(jì)數(shù)和控制菌檢查，其中微生物計(jì)數(shù)包括需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)檢查。相應(yīng)限度標(biāo)準(zhǔn)包括需氧菌總數(shù)限度標(biāo)準(zhǔn)、霉菌和酵母菌總數(shù)限度標(biāo)準(zhǔn)以及控制菌的種類。藥包材微生物限度標(biāo)準(zhǔn)的制定宜綜合考慮其原料來(lái)源及性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、使用用途、藥品給藥途徑、藥品限度標(biāo)準(zhǔn)及微生物污染對(duì)患者的潛在危險(xiǎn)等因素。限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)能保證藥品安全性、有效性的要求，一般可由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。需要指出的是，一些特殊的藥包材需要在藥品生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行加工后使用，比如硬片加工成泡罩等，其加工工藝可能會(huì)改變藥包材出廠時(shí)的微生物水平，藥品生產(chǎn)企業(yè)宜對(duì)加工工藝帶來(lái)的微生物水平的變化進(jìn)行合理評(píng)估。

7檢測(cè)頻次

藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜對(duì)需要進(jìn)行無(wú)菌檢查的藥包材產(chǎn)品進(jìn)行逐批檢查。

生物負(fù)載檢測(cè)頻次的確定宜基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，體現(xiàn)如因季節(jié)變化、生產(chǎn)變更或材料變更引起的生物負(fù)載變化，可根據(jù)時(shí)間（如每月、每季度）或生產(chǎn)量（如間隔批次）等原則進(jìn)行，由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定，應(yīng)保證每批產(chǎn)品的生物負(fù)載均符合可接受水平。

微生物限度檢查頻次可參考ICH Q6A和國(guó)內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定，應(yīng)保證每批產(chǎn)品的微生物限度均符合限度標(biāo)準(zhǔn)。

9653藥包材微生物檢測(cè)指導(dǎo)原則起草說(shuō)明

1.制修訂的目的意義

本指導(dǎo)原則基于風(fēng)險(xiǎn)管理的理念，為藥包材成品質(zhì)量控制中微生物檢測(cè)項(xiàng)目設(shè)置、方法建立、接受標(biāo)準(zhǔn)以及檢測(cè)頻次等提供指導(dǎo)，以滿足藥包材生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定和微生物控制的需求。

2.需要重點(diǎn)說(shuō)明的問(wèn)題

2.1.對(duì)標(biāo)準(zhǔn)范圍的說(shuō)明

本指導(dǎo)原則著重解決各種藥包材成品微生物檢測(cè)該檢測(cè)什么、怎么檢測(cè)、指標(biāo)是什么以及常規(guī)檢測(cè)策略的問(wèn)題,配套藥包材標(biāo)準(zhǔn)體系中各通則的構(gòu)建，為藥包材生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供指南。藥包材生產(chǎn)環(huán)境的沉降菌、浮游菌、表面微生物以及工藝用水/用氣等通用微生物檢監(jiān)測(cè)技術(shù)不在本指導(dǎo)原則范圍以內(nèi)。

2.2.對(duì)檢測(cè)項(xiàng)目設(shè)置的說(shuō)明

對(duì)于無(wú)菌檢查和微生物限度檢查的要求與藥品基本一致。為了清洗及滅菌過(guò)程的有效驗(yàn)證和常規(guī)控制，本指導(dǎo)原則引入生物負(fù)載測(cè)定，提高藥包材質(zhì)量控制水平，為無(wú)菌藥品的質(zhì)量控制提供保證。需要指出的是，本指導(dǎo)原則中的生物負(fù)載并不涵蓋無(wú)菌藥包材生產(chǎn)企業(yè)過(guò)程控制中的生物負(fù)載。

2.3.對(duì)檢測(cè)方法的說(shuō)明

由于藥包材種類繁多，難以針對(duì)每個(gè)品種給出具體的、明確的試驗(yàn)方法及參數(shù)，同時(shí)考慮生產(chǎn)企業(yè)方法建立個(gè)性化、自主性的需求，本指導(dǎo)原則給出了無(wú)菌檢查、生物負(fù)載測(cè)定和微生物限度檢查方法設(shè)計(jì)和驗(yàn)證的指南，不同類型藥包材生產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)本指導(dǎo)原則建立方法并完成方法驗(yàn)證后，在常規(guī)檢測(cè)中采用驗(yàn)證的方法實(shí)施日常檢測(cè)。

2.4.對(duì)接受標(biāo)準(zhǔn)的說(shuō)明

無(wú)菌檢查為定性試驗(yàn)。

與微生物限度不同，生物負(fù)載測(cè)定主要為隨后的清洗和/或滅菌提供信息，藥包材攜帶的微生物會(huì)被滅菌過(guò)程殺滅，不會(huì)進(jìn)入藥品，但生物負(fù)載水平的建立也宜考慮隨后滅菌過(guò)程的經(jīng)濟(jì)性以及對(duì)制劑內(nèi)毒素水平的影響等。生物負(fù)載測(cè)定主要基于生產(chǎn)過(guò)程正常運(yùn)行條件下收集到的歷史數(shù)據(jù)建立，也由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。

對(duì)于微生物限度檢查，由于藥包材攜帶的微生物會(huì)進(jìn)入藥品后接觸患者，所以限度標(biāo)準(zhǔn)的制定宜綜合考慮原料來(lái)源及性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、藥品給藥途徑及微生物污染對(duì)患者的潛在危險(xiǎn)等因素，一般參照藥品考慮需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)以及控制菌的檢出。在滿足藥品安全性、有效性等方面考量的基礎(chǔ)上，一般由供需雙方在企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。

2.5.對(duì)常規(guī)檢測(cè)策略的說(shuō)明

目前藥包材產(chǎn)品的原料多為塑料、玻璃、橡膠、金屬等，這些材料為非天然來(lái)源、具有低水分活度、本身不易滋生微生物的特點(diǎn)。而且，藥包材產(chǎn)品的加工工藝多為熱加工，可降低原料本身的初始生物負(fù)載，故藥包材產(chǎn)品一般生物負(fù)載都比較低。但即使如此，如果藥包材原料的初始生物負(fù)載過(guò)高，或者藥包材的生產(chǎn)過(guò)程控制欠缺等，微生物仍有引入到藥包材產(chǎn)品中的可能。藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估制定適宜的檢測(cè)策略，避免過(guò)度控制及失控情況的出現(xiàn)。

2.6.其他

本指導(dǎo)原則僅代表藥品監(jiān)管部門當(dāng)前的觀點(diǎn)和認(rèn)識(shí)，隨著科學(xué)研究的進(jìn)展，本指導(dǎo)原則中的相關(guān)內(nèi)容將不斷完善與更新。