本法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家免體內(nèi)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。

供試用家兔 供試用的家兔應(yīng)健康合格，體重1.7kg以上(用于生物制品檢査用的家兔體重為1.7~3.0kg)，雌兔應(yīng)無(wú)孕。預(yù)測(cè)體溫前7日即應(yīng)用同-飼料飼養(yǎng)，在此期間內(nèi)，體重應(yīng)不減輕，精神、食欲、排泄等不得有異常現(xiàn)象。未曾用于熱原檢査的家免;或供試品判定為符合規(guī)定，但組內(nèi)升溫達(dá)0.6的家兔;或3周內(nèi)未曾使用的家兔,均應(yīng)在檢査供試品前7日內(nèi)預(yù)測(cè)體溫,進(jìn)行挑選。挑選試驗(yàn)的條件與檢査供試品時(shí)相同,僅不注射藥液，每限30分鐘測(cè)量體溫1次，共測(cè)8次，8次體溫均在38.0~39.6'的范圍內(nèi),且最高與最低體溫相差不超過(guò)0.4℃的家兔,方可供熱原檢査用。用于熱原檢査后的家兔，如供試品判定為符合規(guī)定，至少應(yīng)休息48小時(shí)方可再供熱原檢査用，其中升溫達(dá)0.6℃的家兔應(yīng)休息2周以上。對(duì)用于血波制品、抗毒素和其他同一抗原性供試品檢測(cè)的家兔可在5天內(nèi)重復(fù)使用1次。如供試品判定為不符合規(guī)定，則組內(nèi)全部家兔不再使用。

試驗(yàn)前的準(zhǔn)備，熱原檢査前1~2日,供試用家兔應(yīng)盡可能處于同一溫度的環(huán)境中,實(shí)驗(yàn)率和詞美室的溫度相差不得大于3℃，目應(yīng)控制在17~25°C在試驗(yàn)全部過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室溫度變化不得大于3℃，應(yīng)防止動(dòng)物騷動(dòng)并避免噪聲干擾。家兔在試驗(yàn)前至少1小時(shí)開(kāi)始停止給食并置于寬松適宜的裝置中，直至試驗(yàn)完畢。測(cè)量家兔體溫應(yīng)使用精密度為±0.1℃的測(cè)溫裝置。測(cè)溫探頭或肛溫計(jì)插入肛門(mén)的深度和時(shí)間各兔應(yīng)相同,深度一般約6cm,時(shí)間不得少于1.5分鐘，每隔30分鐘測(cè)量體溫1次,一般測(cè)量2次，兩次體溫之差不得超過(guò)0.2℃,以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當(dāng)日使用的家兔，正常體溫應(yīng)在38.0~39.6°℃的范圍內(nèi)，且同組各兔間正常體溫之差不得超過(guò)1.0℃

與供試品接觸的試驗(yàn)用器皿應(yīng)無(wú)菌、無(wú)熱原。去除熱原通常采用干熱滅菌法(250℃、30分鐘以上)，也可用其他適宜的方法。

檢查法取適用的家兔3只，測(cè)定其正常體溫后15分鐘以內(nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測(cè)量其體溫1次，共測(cè)6次，以6次體溫中最高的一次減去正常體溫,即為該兔體溫的升高溫度()。如3只家兔中有1只體溫升高0.6℃或高于0.6℃，或3只家兔體溫升高的總和達(dá)1.3℃或高于1.3℃，應(yīng)另取5只家免復(fù)試，檢查方法同上。

結(jié)果判斷 在初試的3只家兔中，體溫升高均低于0.6℃，并且3只家兔體溫升高總和低于1.3℃;或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0.6℃C或高于0.6℃C的家兔不超過(guò)1只，并目初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和為3.5℃或低于3.5℃，均判定供試品的熱原檢育符合規(guī)定

在初試的3只家兔中，體溫升高0.6'或高于0.6'的家免超過(guò)1只;或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0.6'℃或高于0.6'℃的家免超過(guò)1只;或在初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和超過(guò)3.5℃，均判定供試品的熱原檢查不符合規(guī)定。

當(dāng)家兔升溫為負(fù)值時(shí)，均以0℃計(jì)。

來(lái)源：藥典委