藥用塑料瓶細(xì)胞毒性檢查法系將供試品或供試品液接觸細(xì)胞，通過對細(xì)胞形態(tài)、增殖和抑制影響的觀察，評價供試品對外細(xì)胞的毒性作用。

藥用HDPE瓶

試驗用細(xì)胞 推薦使用小鼠成纖維細(xì)胞L-929。試驗時采用傳代48~72h生長旺盛的細(xì)胞。

試驗前的準(zhǔn)備 與樣品及細(xì)胞接觸的所有器具均需無菌。必要時可采用濕熱滅菌和115°C保持30分鐘；干熱滅菌如250度保持30分鐘或用180度保持2h。

供試品液的制備 提取介質(zhì)的選擇宜反映出提取的目的，優(yōu)先選用含血清哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)作為提取介質(zhì)。除另有規(guī)定外，按品種項下規(guī)定的提取介質(zhì)制成供試品液。將供試品切成0.5cmX2cm條狀，用濕熱滅菌或紫外線照射消毒后，置玻璃容器內(nèi)。除另有規(guī)定外，按表1選擇提取比例，使提取液浸沒供試品，按表2選擇提取條件（若采用含血清培養(yǎng)基，應(yīng)用（37±1）度的條件）。

1、相對增殖度法

陰性對照液制備 為不加供試品的細(xì)胞培養(yǎng)液。

陽性対照液制備 取生物毒性參比物質(zhì)，照供試品制備項下的規(guī)定進行，如6.3%苯酚的細(xì)胞培養(yǎng)液。

檢查法 取33個培養(yǎng)瓶，分別加入4X10⁴個/ml濃度細(xì)胞懸液1ml，細(xì)胞培養(yǎng)液4ml，置（37±1）度，（5±1）%CO₂條件下培養(yǎng)24h。培養(yǎng)24好后棄原培養(yǎng)液。

陰性對照組：取13個培養(yǎng)瓶加入5ml含50%供試品液的細(xì)胞培養(yǎng)液，置（37±1）度，（5±1）%CO₂的條件下繼續(xù)培養(yǎng)7天。

細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和計數(shù)；在更換細(xì)胞培養(yǎng)液的當(dāng)天，取3瓶陰性對照組，并在更換后第2、4、7天，每組各取3瓶進行細(xì)胞形態(tài)觀察和細(xì)胞計數(shù)。

毒性評定 細(xì)胞形態(tài)分析標(biāo)準(zhǔn)按表3規(guī)定

根據(jù)各組織細(xì)胞濃度按下式計算細(xì)胞相對增殖度（RGR）：

結(jié)果評價  試驗組相對增殖度（以第7天的細(xì)胞濃度計算）為0級或1級判為合格。試驗組相對增殖度為2級，應(yīng)結(jié)合形態(tài)綜合評價，輕微毒或無毒的判為合格。試驗組相對增殖度為3級~5級判為不合格。