醫(yī)藥包裝中細(xì)胞毒性檢查法是較為重要的一個(gè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),細(xì)胞毒性檢查法系將供試品或供試品液接觸細(xì)胞,通過(guò)對(duì)細(xì)胞形態(tài)、增殖和抑制影響的觀察,評(píng)價(jià)供試品對(duì)體外細(xì)胞的毒性作用。
供試品制備 采用供試品的平整部分,表面積不小于100mm2。
陰性對(duì)照制備 取高密度聚乙烯參比物質(zhì),照供試品制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行
陽(yáng)性對(duì)照制備 取生物毒性養(yǎng)性參比物質(zhì),照供試品制備項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行
檢查法 取生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞懸浮液(1x105個(gè)/ml)2ml,置直徑35mm的平皿培養(yǎng)單層細(xì)胞。置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h至近匯合單層細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基,替換為0.8ml的新鮮培養(yǎng)基。
在每個(gè)培養(yǎng)皿中單獨(dú)放置1個(gè)供試品、陽(yáng)性對(duì)照或陰性對(duì)照,每個(gè)試樣至少設(shè)置2個(gè)平行。將所有的培養(yǎng)物置(37±1)°C含(5±1)%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中至少培養(yǎng)24h,培養(yǎng)箱保持適當(dāng)?shù)臏囟?。顯微鏡下觀察每個(gè)供試品、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照周?chē)匾獣r(shí)應(yīng)進(jìn)行染色。
結(jié)果評(píng)價(jià) 按照瓊脂擴(kuò)散法結(jié)果評(píng)價(jià)項(xiàng)下的規(guī)定進(jìn)行。若樣品不超過(guò)2級(jí)(輕微毒),則樣品判為合格。若試驗(yàn)系統(tǒng)無(wú)效需要重復(fù)試驗(yàn)過(guò)程。